8.2.3.13.1 الحد الأدنى لسمك الخط والأنواع وأحجام الخطوط يجب تحديد أنواع الخطوط وأحجام الخطوط المستخدمة في الرسومات، بالإضافة إلى الحد الأدنى للسمك.

من حيث المبدأ، يشبه هذا الإجراء تحديد MIC في وسط سائل. قم بإعداد العديد من أطباق بيتري مع التخفيفات التدريجية للمضاد الحيوي المذاب في الوسط. أضف الأجار المنصهر، ثم قم بتبريد الأطباق حتى يتصلب الأجار. يتم زراعة واحدة أو أكثر من البكتيريا. إن وضع خط على سطح الوسط ثم الحضانة في منظم الحرارة للوقت المطلوب يحدد الحد الأدنى لتركيز المضاد الحيوي الذي يتم عنده تثبيط نمو البكتيريا. إحدى مزايا هذه الطريقة مقارنة بطريقة المعايرة السائلة هي أنها مناطق مختلفةيمكن زرع نفس الكأس أنواع مختلفةأو سلالات البكتيريا. ونتيجة لذلك، يمكن تحديد قيم MIC للعديد من البكتيريا في تجربة واحدة (الشكل 2.2).

1. تحديد نشاط المضادات الحيوية

1. العوامل المؤثرة على التصميم

/

الجدول 2.1. العوامل المؤثرة في تحديد نشاط المضادات الحيوية
كائن اختباري
تكوين الوسط (الرقم الهيدروجيني، الأيونات، المصل، المضادات)
حجم اللقاح وكثافته (عدم التجانس السكاني، آليات التعطيل، دخول المواد المضادة)
ظروف الحضانة (الوقت، درجة الحرارة، التهوية)
أ. تكوين البيئة
دعونا نعتبر كمثال مضادًا حيويًا يمنع التخليق الحيوي لأحد الأحماض الأمينية. إذا تم اختبار المضاد الحيوي في وسط لا يحتوي على هذا الحمض الأميني، فيبدو أن له نشاطًا مرتفعًا جدًا، وبعبارة أخرى، قيمة MIC منخفضة. عند اختباره في وسط يحتوي على حمض أميني يثبط تركيبه ويمكن للبكتيريا الحصول عليه من الوسط، سيبدو المضاد الحيوي غير نشط.
بالإضافة إلى هذه التأثيرات المحددة، غالبا ما يتم ملاحظة تأثيرات بيئية أقل تحديدا والتي لا ترتبط مباشرة بآلية العمل أو بها التركيب الكيميائيمضاد حيوي. إحدى الحالات المثيرة للاهتمام بشكل خاص هي وجود المصل في الوسط. يتم إدخاله في الوسط عند تحديد MIC من أجل خلق ظروف فسيولوجية تذكرنا بتلك الموجودة في الدم. ترتبط العديد من المضادات الحيوية ببروتينات المصل (خاصة الألبومين)، مما يؤدي إلى انخفاض عدد جزيئات المضادات الحيوية الحرة التي يمكنها دخول الخلايا البكتيرية. عادة ما يرتبط ارتباط المضاد الحيوي ببروتينات المصل بمدى محبة بعض البدائل للدهون في جزيئه.
من الواضح أن شروط تحديد MIC في وسط سائل تختلف عن الظروف في وسط صلب، وذلك فقط بسبب وجود الأجار في وسط صلب. يمكن للأجار المحتوي على S03-rpyn-py أن يمتص المضاد الحيوي، أو يغير قدرته على الانتشار، أو يمتص الأكسجين المذاب وبعض مكونات الوسط المغذي. ليس من المستغرب إذن أن تعتمد قيمة MIC للمضاد الحيوي ضد بكتيريا معينة على ما إذا كان يتم تحديده في وسط سائل أو في وسط صلب، حتى لو كان هذين الوسيطين، باستثناء وجود أو عدم وجود أجار، متطابقة في التكوين. ويجب أن نتذكر أيضًا أن فسيولوجيا الخلايا قد تختلف اعتمادًا على ما إذا كانت تنمو منفردة في سائل أو كمستعمرات على سطح وسط صلب.
جداً تأثير قوييتأثر نشاط المضادات الحيوية بقيمة الرقم الهيدروجيني للبيئة. بالإضافة إلى التأثيرات الثانوية، مثل تأثير الرقم الهيدروجيني على معدل نمو الكائنات الحية الدقيقة، وبالتالي،
ومع ذلك، مما يؤثر بشكل غير مباشر على قابليتها، فإن قيمة الرقم الهيدروجيني لها تأثير قوي ومباشر للغاية على قدرة الدواء على اختراق الخلية البكتيرية. على سبيل المثال، تنتشر المواد ذات الشكل غير المتأين بشكل أفضل عبر غشاء الخلية والغشاء البلازمي مقارنة بالمواد ذات الشكل المتأين. وبالتالي، فإن الرقم الهيدروجيني للوسط، الذي يحدد درجة تأين المضاد الحيوي الأساسي أو الحمضي، يمكن أن يؤثر بشكل مباشر على معدل تغلغله في البكتيريا، وبالتالي فعاليته.
ب. كثافة وكمية اللقاح البكتيري
كثافة اللقاح هي عدد البكتيريا الملقحة مقسومًا على الحجم الذي تنمو فيه. وعادة ما يتم التعبير عنها بعدد الخلايا في 1 مل من الثقافة. حجم اللقاح هو العدد الإجمالي للبكتيريا الملقحة. لا تتأثر المستويات المتوسطة المتوسطة للعديد من المضادات الحيوية بالتغيرات في كثافة اللقاح الشائع الاستخدام (103-106 بكتيريا/مل). في الواقع، حتى عند التركيزات المنخفضة جدًا من المضاد الحيوي، على سبيل المثال 0.01 ميكروجرام/مل، تظل نسبة عدد جزيئات المضاد الحيوي إلى عدد الخلايا البكتيرية كبيرة جدًا (عند تركيز مضاد حيوي بوزن جزيئي قدره 1000 يساوي 1000 ميكروجرام/مل). 0.01 ميكروجرام/مل في 1 مل من المحلول يحتوي على 1012 جزيء تقريبًا. ومع ذلك هناك بعض الاستثناءات. على سبيل المثال، غالبًا ما يتم امتصاص الكثير من جزيئات المضادات الحيوية السطح الخارجيخلية بكتيرية. إذا كانت الكثافة البكتيرية عالية، فإن عدد جزيئات المضادات الحيوية الحرة التي يمكن أن تدخل الخلية يقل بشكل كبير. بالإضافة إلى ذلك، غالبًا ما يكون من الضروري منع نمو خلية واحدة عدد كبير منجزيئات المضادات الحيوية. مع نمو البكتيريا، فإنها تقوم بتصنيع وإطلاق إنزيمات في البيئة يمكنها تدمير المضاد الحيوي (على سبيل المثال، إنزيمات p-lactamase التي تعمل على المضادات الحيوية p-lactam؛ انظر الفصل 4). تعتمد كمية المضاد الحيوي المدمر على تركيز الإنزيم في الوسط المغذي، وبالتالي تعتمد على حجم اللقاح.
للوهلة الأولى، يبدو أنه إذا كانت كثافة المزرعة البكتيرية هي نفسها، فلا يهم ما إذا تم اختبار نشاط المضاد الحيوي بكميات صغيرة، على سبيل المثال، 0.25 مل أو أقل في أنظمة مصغرة، أو في حجم 0.25 مل أو أقل. 10 مل في أنابيب المختبر العادية. إذا كانت جميع البكتيريا الموجودة في مجتمع ما متطابقة، فلن يكون هناك اختلاف في النتائج.
عندما يكون العدد الإجمالي للبكتيريا في اللقاح مرتفعًا جدًا، هناك احتمال متزايد بأن تكون الخلايا الأقل حساسية للمضادات الحيوية موجودة في البيئة. سيتم قمع نمو جميع الخلايا الحساسة، ولكن الخلايا الأقل حساسية (من حيث المبدأ، قد تكون خلية واحدة) سوف تتضاعف، وبعد الحضانة لمدة 18 ساعة،

الجدول 2.2. العوامل المؤثرة على نشاط بعض المضادات الحيوية

سكان البكتيريا مع كثافة عالية. عادة ما يشير التباين الكبير في قيمة MIC مع التغير في عدد الخلايا الملقحة إلى ارتفاع وتيرة الطفرات المقاومة للمضادات الحيوية (الفصل 4). يختلف تواتر ظهور الطفرات المقاومة بين المضادات الحيوية المختلفة. وفي حالة المضادات الحيوية المستخدمة في العيادة، تتراوح من 10~7 إلى 10-10.
لا يصف هذا القسم جميع العوامل التي يمكن أن تؤثر على نشاط المضاد الحيوي ضد بكتيريا معينة (الجدول 2.2). ولذلك، لاستخدام تثبيط نمو البكتيريا ل تحديد الكمياتنشاط المضادات الحيوية وللحصول على البيانات التي يمكن استنساخها في مختبرات مختلفة، من الضروري أن يتم تحديد جميع الشروط بدقة وتوحيدها إن أمكن.

(ميكروفون) - الحد الأدنى من التركيز المثبط (القمعي). - أدنى تركيز للمضاد الحيوي الذي يمنع النمو المرئي للكائنات الحية الدقيقة قيد الدراسة في المختبر(في المرق أو الأوساط المغذية) في ظل ظروف تجريبية قياسية ويتم التعبير عنها بالميكروجرام/مل (ملجم/لتر) أو الوحدات/مل.

الحد الأدنى لتركيز مبيد الجراثيم (MBC) -أدنى تركيز للمضادات الحيوية، والتي في الدراسة في المختبريتسبب في موت 99.9% من الكائنات الحية الدقيقة من المستوى الأولي خلال فترة زمنية معينة.

حساسالكائنات الحية الدقيقة - سلالة من الكائنات الحية الدقيقة التي ليس لديها آليات مقاومة هذا الدواء. يتم إيقافه على وسط غذائي عند استخدام المضاد الحيوي بجرعة علاجية.

مقاومة معتدلةالكائنات الحية الدقيقة - سلالة من الكائنات الحية الدقيقة، التي يتوقف نموها على وسط غذائي فقط عند استخدام المضاد الحيوي بأعلى جرعة. يتم علاج الالتهابات التي تسببها الكائنات الحية الدقيقة ذات المقاومة المعتدلة في غياب أدوية بديلة، أعلى جرعة (علاجية قصوى) من المضاد الحيوي.

الكائنات الحية الدقيقة المقاومة -سلالة من الكائنات الحية الدقيقة التي لديها آليات مقاومة لدواء معين. ويتوقف نموه على وسط غذائي فقط عند استخدام تركيزات عالية جدًا من الدواء، والتي لا يمكن تكوينها في الجسم بسبب سميتها العالية. عند علاج الالتهابات التي تسببها هذه الكائنات الحية الدقيقة، لا يوجد أي تأثير سريري من العلاج حتى عند الاستخدام أعلى جرعةمضاد حيوي. في هذه الحالة، قد يكون هناك ملاحظة آثار جانبيةمضاد حيوي.

مؤشرات لتحديد حساسية الكائنات الحية الدقيقة للمضادات الحيوية:

1) تحديد الحساسية للمضادات الحيوية الجديدة الموصى باستخدامها؛

2) المراقبة الدورية لمقاومة المضادات الحيوية لدى الأفراد المراكز الطبيةوفي مناطق جغرافية مختلفة لرصد انتشار مقاومة المضادات الحيوية؛

3) مبرر العلاج بالمضادات الحيوية الكافية في المرضى الأفراد في حالات:

أ) عزل الكائنات الحية الدقيقة من السوائل والأعضاء والأنسجة البشرية المعقمة في المقام الأول؛

ب) عند عزل الكائنات الحية الدقيقة من البيئات الحيوية غير المعقمة في المقام الأول، ينبغي أن يسبق تقييم الحساسية تقييم للأهمية السريرية للكائنات الحية الدقيقة المعزولة؛

ج) العدوى المقاومة للأدوية التجريبية؛

د) حالات العدوى الفريدة ونقص الخبرة في علاجها؛

هـ) الالتهابات التي تتطلب علاجًا طويل الأمد (يتم اكتشاف مقاومة للمضادات الحيوية كل أسبوع من العلاج، نظرًا لاحتمال حدوث تغيير في مسببات الأمراض).

تحديد حساسية الكائنات الحية الدقيقة للمضادات الحيوية غير مناسب:

1) للممثلين البكتيريا الطبيعيةالبشر، عندما يكونون معزولين عن بيئاتهم الطبيعية؛

2) لأنواع الكائنات الحية الدقيقة التي لم يتم وصف الأشكال المقاومة لبعض المضادات الحيوية فيها. على سبيل المثال، تعتبر المكورات العقدية المقيحة حساسة للبنسلين، لذا فإن اختبار الحساسية لهذه الأدوية ليس عمليًا في الممارسة الروتينية.

جدول رقم 2 لملحق إجراءات إجراء فحص طبي للتسمم (كحول، مخدر أو سام آخر)، تمت الموافقة عليه بقرار من وزارة الصحة الاتحاد الروسي(مشروع) "المستويات الحدية لمحتوى المواد المخدرة، المؤثرات العقلية، آخر المواد الكيميائيةومستقلباتها، والتي يتم تحديدها بطرق التحليل التأكيدي."

ملحوظة: مستوى العتبةهو الحد الأدنى لتركيز المادة (مستقلبها) في جسم بيولوجي، ويتم تحديده بطرق التحليل الأولية أو التأكيدية، والتي تعتبر نتيجة الدراسة إيجابية عند اكتشافها.

في الواقع جدول مماثل يسمى " مستويات العتبة لطرق تحليل البول التأكيدية" يتم تقديمه في المختبر الكيميائي والسموم المركزي في قسم علم السموم التحليلي والطب الشرعي بالولاية مؤسسة تعليميةأعلى التعليم المهنيجامعة موسكو الطبية الحكومية الأولى التي تحمل اسم آي إم سيتشينوف (TsKhTL GOU VPO جامعة موسكو الطبية الحكومية الأولى التي تحمل اسم آي إم سيتشينوف) التابعة لوزارة الصحة في الاتحاد الروسي بتاريخ 30 أغسطس 2011 رقم 179-25/12I، حيث، مع ذلك، من بين وفي أشياء أخرى، يُشار إلى التركيزات بالفينوباربيتال (1000 نانوجرام/مل)، ومواد أخرى من مجموعة الباربيتورات (100 نانوجرام/مل) والكوتينين (100 نانوجرام/مل). وفقًا لهذا المختبر السريري المركزي التابع للمؤسسة التعليمية الحكومية العليا التعليم المهني جامعة موسكو الطبية الحكومية الأولى التي تحمل اسم آي إم سيتشينوف، وفقًا للفقرة 2 من أمر وزارة الصحة والتنمية الاجتماعية في الاتحاد الروسي بتاريخ 27 يناير 2006 رقم 40 "بشأن تنظيم دراسات السمية الكيميائية للتشخيص التحليلي" "وجود الكحول والمخدرات والمؤثرات العقلية وغيرها من المواد السامة في جسم الإنسان"، تم تطوير واعتماد متطلبات إجراء دراسات السمية الكيميائية للتشخيص التحليلي لوجود المخدرات والمؤثرات العقلية وغيرها من المواد السامة في جسم الإنسان. "

على وجه الخصوص، وفقا للفقرة 12 من الرسالة الإعلامية، عند إجراء الفحص الطبي لسائقي المركبات، واختبار الطلاب، وإجراء الدراسات الكيميائية والسمومية عند التقديم على المواطنين وغيرها من الحالات التي ينص عليها القانون، واختبار السوائل تجويف الفم(اللعاب) أمر غير مقبول، لأنه لا يسمح بإثبات وجود المخدرات والمؤثرات العقلية وغيرها من المواد السامة في جسم الإنسان بشكل موثوق. المواد الخاضعة للرقابةيمكن تحديده في سائل الفم (اللعاب) في فترة زمنية لا تتجاوز عدة ساعات من لحظة الاستهلاك.

المتطلبات ل الوسائل التقنية، يستخدم للكشف عن المخدرات والمؤثرات العقلية والمواد السامة الأخرى (مستقلباتها) في عينات البول، خلال الدراسات الكيميائية السمية الأولية (الملحق رقم 1 إلى التوصيات المنهجية: قواعد إجراء الدراسات الكيميائية والسمية لتحديد وجودها في جسم الطلاب منظمات التعليم العاموالمنظمات التعليمية المهنية، وكذلك المنظمات التعليمية تعليم عالىبغرض الكشف المبكرالاستهلاك غير القانوني للمخدرات والمؤثرات العقلية والمخدرات والمؤثرات العقلية والمواد السامة الأخرى (مستقلباتها) / تم تطويره بواسطة: رابطة المتخصصين ومنظمات الخدمات المخبرية "اتحاد الطب المخبري"، الذي حرره كبير المتخصصين المستقلين في التحليل والطب الشرعي علم السموم من وزارة الصحة الروسية، الدكتور ح.ن.، البروفيسور ب.ن. إيزوتوف وكبير الأخصائيين السريريين المستقلين التشخيص المختبريوزارة الصحة الروسية، دكتوراه في العلوم الطبية، البروفيسور أ. ج. كوشيتوف // موسكو، 2015)

متطلبات الوسائل التقنية المستخدمة للكشف عن المخدرات والمؤثرات العقلية والمواد السامة الأخرى (مستقلباتها) في عينات البول عند إجراء الدراسات السمية الكيميائية التأكيدية (الملحق رقم 2 للمصدر أعلاه)

وفي الوقت نفسه، عند القيام بالدفاع في قضايا الجرائم الإداريةبموجب المادتين 12.8 و12.27 الجزء 3 من قانون الجرائم الإدارية للاتحاد الروسي، وكذلك في الحالات التي تنص على المسؤولية الجنائية عن قيادة السيارة في حالة سكر (المادتان 264 و264.1 من القانون الجنائي للاتحاد الروسي)، ينبغي لنا ولا ننسى أن المسؤولية الإدارية تنشأ عند وجود المواد المخدرة أو المؤثرات العقلية في جسم الإنسان، بغض النظر عن تركيزها في جسم الإنسان، في الدم، وفي البول.

في ضوء ما سبق، يتم التحديد في إطار فحوصات المخدرات، والدراسات الكيميائية السمية، والدراسات الكيميائية الجنائية للمخدرات المخدرات والمؤثرات العقلية والسامة والمواد مسكرحتى على مستوى “حد الكشف عن الطريقة المستخدمة” إذا جاز التعبير هو أساس لجذب السائق عربةالمسؤولية الإدارية أو الجنائية بموجب المواد ذات الصلة من قانون الجرائم الإدارية للاتحاد الروسي و/أو القانون الجنائي للاتحاد الروسي.

للحصول على معلومات - " "

7. جوهر مفاهيم الحد الأدنى من التركيز المثبط (القمعي) والحد الأدنى من تركيز مبيد للجراثيم.

الحد الأدنى من التركيز المثبط (MIC)- الحد الأدنى لتركيز المادة العلاجية الكيميائية أو المطهرة التي تسبب قمع كاملمرئية للعين المجردة نمولكائن حي دقيق معين على الوسائط تحت ظروف تجريبية قياسية.

تقاس بالميكروجرام/مل أو الوحدات. أجراءات. يتم تأسيسه عن طريق زرع ثقافة الاختبار على الوسائط الصلبة أو السائلة التي تحتوي على تركيزات مختلفة من الدواء.

الحد الأدنى لتركيز مبيد الجراثيم (MBC)- الحد الأدنى لتركيز عامل العلاج الكيميائي أو المطهر الذي يسبب تدمير كاملالبكتيريا تحت الظروف التجريبية القياسية.

تقاس بالميكروجرام/مل أو الوحدات. أجراءات. يتم تأسيسه عن طريق زرع ثقافة الاختبار على وسائط مغذية صلبة أو سائلة تحتوي على تركيزات مختلفة من الدواء. للتمييز عن MIC، يتم تلقيح المناطق المعقمة أو الأنابيب الشفافة على الوسائط بدون الدواء (يشير ظهور النمو إلى تأثير ثابت، ويشير غيابه إلى تأثير قاتل).

يتم استخدام MBC وMIC في العلاج الكيميائي والمطهرات لاختيار الأدوية والجرعات الفعالة لمريض معين.

8. جوهر مفاهيم الحساسية ومقاومة العامل الممرض وتأثير ما بعد المضاد الحيوي.

حساسية مسببات الأمراض– عدم وجود آليات مقاومة الكولسترول. في هذه الحالة، يتم قمع تكاثر العامل الممرض بجرعة علاجية متوسطة تتجاوز الحد الأدنى للتركيز المثبط بمقدار 2-4 مرات.

مقاومة مسببات الأمراض– وجود آليات مقاومة الكولسترول. لا يتم قمع نمو العامل الممرض عن طريق تركيز الدواء الذي تأثير سامفي الجسم الحي.

تأثير ما بعد المضاد الحيوي- التثبيط المستمر للنشاط البكتيري بعد ملامستها لفترة قصيرة لعقار مضاد للبكتيريا.

9. محددات السمية الانتقائية لعوامل العلاج الكيميائي.

1) يتراكم CS في الخلايا الميكروبية بتركيزات أكبر بعدة مرات من خلايا الثدييات

2) يعمل CS على الهياكل الموجودة فقط في الخلية الميكروبية (جدار الخلية، DNA gyrase type II) والتي تكون غائبة في خلية الثدييات

3) العمل على CS العمليات البيوكيميائية، ويحدث حصرا في الخلايا الميكروبية ويغيب في خلايا الثدييات.

10. جوهر الفرق بين الخصائص الدوائية والعلاج الكيميائي.

1. يعمل العلاج الدوائي الديناميكي على مستوى بنية الأنظمة الوظيفية، وعادةً ما تكون آثاره قابلة للعكس. بالنسبة للعلاج الكيميائي، فإن العوامل الأكثر قيمة هي تلك التي لها تأثير لا رجعة فيه.

2. تسبب الأدوية الديناميكية الدوائية استجابة تدريجية لنظام الجسم؛ بالنسبة لأدوية العلاج الكيميائي، فإن التأثيرات المرغوبة أكثر هي "الكل أو لا شيء".

3. العلاج الكيميائي له استراتيجية موجهة للسبب تهدف إلى تدمير العامل الممرض أو خلايا الجسم المحولة، ويمكن أن يكون العلاج الديناميكي الدوائي موجهًا للسبب ومسببًا للأمراض.

11. المبادئ الأساسية للعلاج الكيميائي العقلاني.

1. يجب أن يكون العامل الممرض حساسًا لـ AB

قاعدة "أفضل عرض" هي جداول مرجعية تأخذ في الاعتبار الخصائص السكانية الإقليمية للحساسية المضادة للبكتيريا.

2. يجب أن يخلق AB تركيزًا علاجيًا في الآفة.

3. نظام الجرعات المناسب في الغالب يعتمد على:

ü مسبب المرض

ü ديناميات المسار السريري للعدوى

ü توطين العدوى

ü مدة وطبيعة الإصابة (حادة أو مزمنة أو بكتيرية)

4. المدة المثلى للعلاج الكيميائي المضاد للميكروبات (على سبيل المثال: يمكن علاج التهاب البلعوم العقدي في 10 أيام، والتهاب الإحليل الحاد غير المصحوب بالمكورات البنية في 1-3 أيام، والتهاب المثانة الحاد غير المعقد في 3 أيام).

لمنع ردود الفعل السلبية، وتطوير العدوى أو المقاومة، يجب أن تتوافق مدة العلاج مع فترة القضاء على العامل الممرض.

5. مراعاة عوامل المريض:

ü تاريخ الحساسية، الكفاءة المناعية

ü وظائف الكبد والكلى

ü التحمل AB عندما يؤخذ عن طريق الفم. امتثال

ü خطورة الحالة

ü العمر، الجنس، الحمل أو الرضاعة، تناول وسائل منع الحمل عن طريق الفم

ü الآثار الجانبية

6. العلاج بالمضادات الحيوية مجتمعة.