رد فعل التراص الدموي غير المباشر(ريجا).

يتم استخدام RIGA في نسختين: مع الأجسام المضادة المعروفة للكشف عن الأجسام المضادة مع الأجسام المضادة المعروفة للكشف عن الأجسام المضادة. هذا التفاعل محدد، ويستخدم لتشخيص الأمراض التي تسببها البكتيريا والريكتسيا. لتنفيذ RIGA، يتم استخدام تشخيصات كريات الدم الحمراء، التي يتم إعدادها عن طريق امتزاز AG أو AT على كريات الدم الحمراء، اعتمادًا على الغرض من الدراسة (الشكل 10.3). في الحالات الإيجابية، يتم وضع علامة على درجة تراص كرات الدم الحمراء بالإيجابيات. تقوم أربع إيجابيات بتقييم التفاعل الذي يكون على شكل طبقة رقيقة من خلايا الدم الحمراء اللاصقة (المظلة) التي تغطي الجزء السفلي من أنبوب الاختبار؛ يُشار إلى وجود فيلم ذو حواف دانتيل صدفية بإيجابيتين. يعتبر العيار هو الحد الأقصى للتخفيف من مادة الاختبار التي تسببت في تراص كريات الدم الحمراء بواسطة إيجابيتين.

أرز. 10.3.

1 - خلايا الدم الحمراء، 2 - كريات الدم الحمراء AG، 3 - مترافق AG، 4-AT

RHA وتفاعل تثبيط التراص الدموي (HAI).

كما ذكرنا سابقًا، يعتمد RHA على قدرة كريات الدم الحمراء على الالتصاق ببعضها البعض عندما يتم امتصاص مستضدات معينة عليها. يتم استخدام السائل السقاء والسلوي، وتعليق الأغشية المشيمية السقاءية لأجنة الدجاج، والمعلقات والمستخلصات من المزارع أو أعضاء الحيوانات المصابة بالفيروسات، والمواد المعدية المحلية كمواد اختبار للتراص الدموي. RGA ليس تفاعلًا مصليًا، لأنه يحدث دون مشاركة المصل المناعي ويستخدم لتحديد التخفيف العامل لمستضد لتحديد مرحلة RGA أو وجود مستضد (فيروس) في مادة الاختبار (على سبيل المثال، للأنفلونزا ). يستخدم التفاعل خلايا الدم الحمراء من الحيوانات والطيور والبشر ذوي فصيلة الدم I (0). لإعداد RGA تقريبي، يتم تطبيق قطرة من تعليق 5٪ من كريات الدم الحمراء وقطرة من مادة الاختبار على شريحة زجاجية وتخلط جيدًا. إذا كانت النتيجة إيجابية، بعد 1-2 دقيقة يتم ملاحظة ظهور تراص كريات الدم الحمراء بشكل مجهري. لإعداد RGA في صف غير مطوي، يتم تحضير التخفيفات المتزايدة بشكل مضاعف لمواد الاختبار في محلول فسيولوجي بحجم 0.5 مل في آبار ألواح البوليسترين. يضاف 0.5 مل من معلق 0.25-1% من خلايا الدم الحمراء إلى جميع أنابيب الاختبار. تؤخذ النتائج في الاعتبار بعد الترسيب الكامل لكريات الدم الحمراء في السيطرة (خلايا الدم الحمراء + المحلول الملحي). يؤخذ التفاعل في الاعتبار حسب طبيعة رواسب كرات الدم الحمراء. في الحالات الإيجابية، يتم وضع علامة على درجة التراص بالإيجابيات. يتم تقييم التفاعل الذي يشبه طبقة رقيقة من خلايا الدم الحمراء اللزجة التي تغطي الجزء السفلي من أنبوب الاختبار (المظلة) بأربع إيجابيات؛ ويتم تمييز التفاعل الذي يحتوي على فجوات في الفيلم بثلاث إيجابيات؛ ووجود فيلم مزود بشريط صدفي تتميز حواف خلايا الدم الحمراء اللزجة بإيجابيتين: رواسب ندفية من خلايا الدم الحمراء محاطة بمنطقة من كتل كرات الدم الحمراء المتراصة، تتوافق مع علامة زائد واحدة. تشير رواسب كريات الدم الحمراء المحددة بشكل حاد، والتي لا يمكن تمييزها عن التحكم، إلى عدم وجود تراص. يعتبر العيار هو الحد الأقصى للتخفيف من مادة الاختبار التي تسببت في تراص كريات الدم الحمراء بواسطة إيجابيتين. إذا كانت نتيجة RGA إيجابية، تستمر الدراسة لتحديد نوع الفيروس المعزول باستخدام RT GA مع الأمصال الخاصة بالنوع. يعتمد RTGA على خاصية المصل المضاد لقمع تراص الدم الفيروسي، حيث أن الفيروس الذي يتم تحييده بواسطة أجسام مضادة معينة يفقد القدرة على تراص خلايا الدم الحمراء. بالنسبة للكتابة المبدئية للفيروسات، يتم استخدام طريقة القطرات على الزجاج. لتحديد نوع الفيروس المعزول بشكل نهائي ومعايرة الأجسام المضادة في الأمصال، يتم وضع اختبار الأشعة السينية الموسع في أنابيب الاختبار أو الآبار. لهذا الغرض، يتم تحضير التخفيفات المزدوجة للأمصال في محلول فسيولوجي وتوزيعها في 0.25 مل. أضف إلى تخفيفات المصل قطرة واحدة من مادة تحتوي على الفيروس وقطرة واحدة من معلق 1% من خلايا الدم الحمراء. عند استخدام RTGA لتحديد نوع الفيروس، يتم استخدام الأمصال الخاصة بالنوع، والتي تتم إضافتها إلى حجم متساوٍ من التخفيف العامل لـ AG. يتم تحديد نوع الفيروس المعزول من خلال المصل المناعي النوعي الذي أظهر أعلى عيار للأجسام المضادة لهذا الفيروس. يتم استخدام RGA وRTGA على نطاق واسع للتشخيص اصابات فيروسية (إلتهاب الدماغ المعدي، والأنفلونزا، وما إلى ذلك) من أجل اكتشاف أجسام مضادة محددة والتعرف على العديد من الفيروسات عن طريق أجسامها المضادة.

هؤلاء تفاعلاتوتسمى غير مباشر (سلبي)، نظرًا لأنهم يستخدمون Ag (أو AT) ممتزًا بشكل مصطنع على سطح الجزيئات الجسيمية المختلفة.

رد فعل التراص الدموي غير المباشر أو السلبي (RNGA, آر بي جي إيه) هي واحدة من التفاعلات المصلية الأكثر حساسية. وهو يعتمد على قدرة AT على التفاعل مع Ag المثبت على خلايا الدم الحمراء المختلفة، والتي تتراكم بعد ذلك. لمزيد من الاستقرار في التشخيص، يتم إضفاء الطابع الرسمي على خلايا الدم الحمراء.

عكس RNGAيستخدم للكشف عن Ag في مصل الدم. لهذا الغرض، لا يتم تثبيت Ag، ولكن AT على كريات الدم الحمراء. تستخدم التفاعلات من هذا النوع على نطاق واسع لتشخيص الأمراض المعدية وإثبات الحمل والكشف فرط الحساسيةإلى الأدوية وما إلى ذلك.

استجابة الكبح التراص الدموي السلبي (RTPGA) - مزيد من التطوير RNGA; بمعنى يتحكم في خصوصيته. على عكس RNGA، يتضمن ثلاثة مكونات؛ Ag وAT وAg (AT) ممتز على كريات الدم الحمراء. في البداية، يتفاعل Ag مع AT (المصل المضاد القياسي)، ثم تضاف كريات الدم الحمراء المتحسسة بنفس Ag (أو AT) إلى الخليط. إذا لم يبق أي AT (أو Ag) مجانيًا في النظام أثناء تفاعل Ag مع AT، فلن يتم ملاحظة تراص تشخيص كريات الدم الحمراء.

يتم إجراء التفاعل للكشف عن المستضدات المسببة للأمراض في مادة الاختبار عن طريق إضافة المصل المناعي إليها. في وجود مستضد متماثل، ترتبط الأجسام المضادة، وبالتالي، بعد إضافة كريات الدم الحمراء الحساسة بواسطة المستضد، لا يحدث تراصها، وهو ما يتم تقييمه على أنه نتيجة ايجابية. ولجعل التفاعل أكثر حساسية، تتم إضافة مصل مناعي محدد إلى مادة الاختبار بكمية قليلة (وحدتان من التراص الدموي). يتم تحديد عيار المصل المناعي أولاً باستخدام RNGA. وحدة التراص الدموي الواحدة هي الحد الأقصى لتخفيف المصل الذي يتسبب في التصاق خلايا الدم الحمراء ببعضها البعض.

المنهجية. أضف 0.025 مل من محلول 1٪ من مصل الأرانب الطبيعي إلى آبار ألواح البوليسترين أو أنابيب التراص وقم بإجراء تخفيفات تسلسلية ثنائية لمادة الاختبار. ثم يضاف 0.025 مل من مصل المناعة إلى جميع الآبار، ويرج الطبق ويترك لمدة 30 دقيقة عند درجة حرارة 37 درجة مئوية أو لمدة ساعة عند درجة حرارة 37 درجة مئوية. درجة حرارة الغرفة. بعد ذلك، أضف 0.025 مل من التشخيص المستضدي إلى جميع الآبار، ثم رجها واتركها لمدة ساعتين، وبعد ذلك يتم أخذ النتائج في الاعتبار.

عند إجراء هذا التفاعل، تتم إضافة عنصر التحكم في خصوصية المصل المناعي إلى عنصر التحكم في RNHA، والذي يتكون من مستضد محدد ومصل مناعي (2، 1، 0.5 وحدة تراص الدم) ومعلق كريات الدم الحمراء المحسسة.

يستخدم RTNGA أيضًا للكشف عن أجسام مضادة محددة (كاملة وحاجبة)، والتي يتم من خلالها إضافة كمية محددة من المستضد إلى مصل الاختبار. إذا كانت تحتوي على أجسام مضادة، فإنها مرتبطة بالمستضد، وبالتالي، بعد إضافة كريات الدم الحمراء الحساسة بواسطة الأجسام المضادة (المرحلة الثانية من RTNGA)، لا تلتصق كريات الدم الحمراء ببعضها البعض.

بفضل الاستخدام الحد الأدنى للكميةالمستضد (جرعتان معادلتان) يكون التفاعل حساسًا للغاية. يتم تحديد عدد جرعات التعادل في إعداد المستضد باستخدام RNGA، في حين يتم إجراء التخفيفات التسلسلية ذات الطيتين للمستضد في محلول 1% من مصل الأرانب الطبيعي ويتم إضافة تشخيص كريات الدم الحمراء المضاد إلى الآبار. تعتبر الجرعة المعادلة للمستضد هي الحد الأقصى للتخفيف، مما يعطي التصاقًا كاملاً لخلايا الدم الحمراء الحساسة.

قبل التفاعل، يتم تخفيف أمصال الاختبار بنسبة 1:5-1:10 ويتم تعطيلها عند درجة حرارة 56 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة. لامتصاص الهيماجلوتينين، يضاف إلى المصل معلق 50% من كريات الدم الحمراء الجاهزة أو المغسولة حديثًا بمعدل 0.1 مل من المعلق لكل 1 مل من المصل المخفف. يتم رج الخليط وحضنه لمدة 30 دقيقة عند 37 درجة مئوية أو لمدة ساعة واحدة في درجة حرارة الغرفة، وبعد ذلك يتم ترسيب خلايا الدم الحمراء بواسطة الطرد المركزي. يمكنك ترك المصل في الثلاجة حتى اليوم التالي لترسيب خلايا الدم الحمراء.

عند إجراء تجربة، يتم تخفيف مادة الاختبار في محلول 1٪ من مصل الأرانب الطبيعي بحجم 0.025 مل في آبار لوحة ميكروتيتر. ثم تتم إضافة جرعتين معادلة من المستضد بحجم 0.025 مل إلى كل بئر. تُرج الأطباق وتُترك لمدة 30 دقيقة عند 37 درجة مئوية أو لمدة ساعة واحدة في درجة حرارة الغرفة. ثم يتم إضافة 0.025 مل من الأجسام المضادة لتشخيص كرات الدم الحمراء إلى جميع الآبار. يتم رج الصفائح وحضنها لمدة 1.5-2 ساعة في درجة حرارة الغرفة، وبعد ذلك يتم أخذ نتائج التفاعل بعين الاعتبار. ويمكن أيضا أن يتم المحاسبة في اليوم التالي. يعتبر عيار مصل الاختبار هو الحد الأقصى للتخفيف الذي لا تلتصق فيه خلايا الدم الحمراء ببعضها البعض.

الخبرة مصحوبة الأنواع التاليةيتحكم:

1) استقرار كريات الدم الحمراء الحساسة (كرات الدم الحمراء + محلول 1% من مصل الأرانب الطبيعي)؛

2) اكتمال استنفاد الهيماجلوتينين في كل مصل اختبار (مصل الاختبار في أدنى التخفيف+ خلايا الدم الحمراء الرسمية)؛

3) صحة تحديد الجرعة المعادلة الدنيا للمستضد (2 و 1 و 0.5 جرعة تحييد المستضد + تشخيص كريات الدم الحمراء للجسم المضاد).

يُستخدم تفاعل التراص الدموي العكسي غير المباشر (رونجا) للإشارة إلى المستضدات البكتيرية والفيروسية في مواد الاختبار، وكذلك للتشخيص السريع لعدد من حالات العدوى.

على عكس RNGA، في هذا التفاعل، لا يتم توعية خلايا الدم الحمراء بواسطة المستضد، ولكن عن طريق الأجسام المضادة، التي يحدث تراصها عند إضافة المستضد.

يتم تثبيت خلايا الدم الحمراء مسبقًا بالفورمالدهيد أو الجلوتارالدهيد ثم ترتبط بجلوبيولين جاما، الذي يتم عزله من الأمصال المناعية وتنقيته من بروتينات المصل الأخرى. يحدث ارتباط جاما جلوبيولين بسطح خلايا الدم الحمراء بمساعدة كلوريد الكروم. للقيام بذلك، أضف حجمًا واحدًا من الغلوبولين المناعي المعزول من مصل المناعة، وحجمًا واحدًا من تعليق 50٪ من كريات الدم الحمراء الفورمالينية وحجمًا واحدًا من محلول كلوريد الكروم 0.1-0.2٪ إلى 8 مجلدات من الماء المقطر. يترك الخليط لمدة 10-15 دقيقة في درجة حرارة الغرفة، ثم تتم معالجة خلايا الدم الحمراء كما في تفاعل التراص الدموي السلبي.

يتم التحقق من خصوصية تشخيص الأجسام المضادة في تفاعل تثبيط التراص الدموي السلبي بواسطة مستضد متماثل. يجب أن يتم تثبيط التفاعل بواسطة مستضد متماثل 16 مرة على الأقل وعدم تثبيطه بواسطة مستضد غير متجانس. يتم استخدام عنصر التحكم لضمان عدم وجود تراص الدم التلقائي.

باستخدام هذا التفاعل، تتم الإشارة إلى مسببات الأمراض في المواد المأخوذة من الأعضاء اشخاص موتىوالحيوانات، على سبيل المثال، من الدماغ والطحال والكبد من الرئتين. إعداد تعليق 10٪ من هذه الأجهزة في محلول كلوريد الصوديوم متساوي التوتر، والطرد المركزي لهم لمدة 30-60 دقيقة عند 10000 دورة في الدقيقة واستخدام المادة طافية كمستضد.

المنهجية.قم بإعداد تخفيفات ثنائية لمادة الاختبار (المستضد) في محلول مثبت. أضف قطرة واحدة من كل تخفيف مستضد إلى 3 آبار متجاورة من اللوحة الدقيقة (يحتل التفاعل 3 صفوف متوازية من الآبار). أضف قطرة واحدة من محلول التثبيت إلى كل بئر من الصف الأول، وقطرة واحدة من مصل المناعة المتماثل المخفف بنسبة 1:10 إلى آبار الصف الثاني، وقطرة واحدة من مصل المناعة غير المتجانسة إلى الصف الثالث. يعمل الصفان الثاني والثالث كعناصر تحكم لخصوصية التفاعل. يترك الخليط لمدة 20 دقيقة في درجة حرارة الغرفة.

أضف قطرة واحدة من تعليق 1% من كريات الدم الحمراء الحساسة (تشخيص الأجسام المضادة لكريات الدم الحمراء) إلى جميع الآبار واهتز اللوحات جيدًا. تؤخذ نتائج التفاعل في الاعتبار بعد 30-40 دقيقة. في وجود مستضد معين، لوحظ التراص الدموي في الصف الأول والثالث (مع مصل غير متجانس) ويغيب في الصف الثاني، حيث يتم تحييد المستضد مسبقًا بمصل متماثل.

يصاحب التفاعل تحكم في كريات الدم الحمراء المتحسسة للتراص التلقائي.

تفاعل تثبيط التراص الدموي العكسي غير المباشر (RTONGA)يسمح لك بتحديد وجود الأجسام المضادة في أمصال البشر والحيوانات.

المنهجية. يتم تخفيف الأمصال 10 مرات بمحلول كلوريد الصوديوم متساوي التوتر، ويتم تسخينها لمدة 20 دقيقة عند درجة حرارة 65 درجة مئوية لتدمير المثبطات غير المحددة، ثم يتم تحضير تخفيفات الأمصال بمقدار ضعفين في محلول تثبيت وجرعة عمل من الأمصال. مستضد يحتوي على 4 وحدات تراصية. أضف قطرة واحدة من كل تخفيف من المصل إلى ثقوب اللوحة الدقيقة وأضف إليها قطرة واحدة من المستضد، الذي يتوافق تخفيفه مع جرعة العمل. بعد الاتصال بمكونات الخليط لمدة 20 دقيقة في درجة حرارة الغرفة، أضف قطرة واحدة من تشخيص الأجسام المضادة لكرات الدم الحمراء إلى جميع الآبار واهتز جيدًا. بعد 1.5-2 ساعة من الحضانة في درجة حرارة الغرفة، يتم أخذ نتائج التفاعل بعين الاعتبار للتراص الدموي. عيار المصل هو أعلى تخفيف له، والذي يثبط تمامًا تفاعل التراص الدموي بأربع وحدات مستضد تراصية.

ويرافق التفاعل ضوابط من كريات الدم الحمراء المحسسة للتراص التلقائي في وجود: أ) محلول تثبيت؛ ب) المستضد الطبيعي (من مادة لا تحتوي على فيروس)؛ ج) مصل الاختبار. ميزة التفاعل هي تنوعه والقدرة على استخدامه للكشف عن المستضدات المختلفة.

تقييم نتائج التراص الدموي. يتم أخذ نتائج RNGA وRONGA وRTONGA في الاعتبار وفقًا لدرجة تراص كريات الدم الحمراء: (++++) - تراص كامل؛ (+++) - تراص أقل اكتمالا؛ (++) – تراص جزئي؛ (+) – آثار التراص. (-) – غياب التراص.

يعتبر التفاعل إيجابياً إذا كان التراص كاملاً (++++) أو شبه كامل (+++)، ولا يعطي التشخيص تراصاً تلقائياً في وجود كل مكون من مكونات التفاعل، كما يتم التحكم في خصوصية التفاعل. المستضد أو الجسم المضاد إيجابي.

تفاعل التراص الميكروبي المباشر (RA). في هذا التفاعل، تقوم الأجسام المضادة (الراصات) بتراص مباشرة مع المستضدات الجسيمية (الراصات). وعادة ما يتم تمثيلها بتعليق الكائنات الحية الدقيقة المعطلة (تفاعل التراص الميكروبي). بناءً على طبيعة التراص المتكون، يتم التمييز بين التراص الحبيبي والندفي. يحدث التراص الحبيبي عندما تلتصق الميكروبات التي تحتوي على المستضد O معًا. تتجمع البكتيريا ذات الأسواط (مستضد H) لتشكل رقائق كبيرة.

لتحديد نوع الكائنات الحية الدقيقة، يتم استخدام الأمصال التشخيصية القياسية. يتم الحصول عليها عن طريق فرط المناعة لحيوانات المختبر مع تعليق البكتيريا. عيار مثل هذا المصل هو أعلى تخفيف له حيث يتم ملاحظة تراص واضح للمستضد المقابل. ومع ذلك، نظرًا لتعقيد البنية المستضدية للبكتيريا، فإن الأمصال المتكتلة تحتوي على أجسام مضادة ليس فقط للأنواع المحددة، ولكن أيضًا لمستضدات المجموعة ويمكن أن تعطي تراصًا جماعيًا مع الأنواع ذات الصلة من البكتيريا. دائمًا ما يكون عيار الأجسام المضادة للمستضدات الخاصة بالأنواع في المصل أعلى من مستضدات المجموعة. لإزالة الأجسام المضادة الخاصة بالمجموعة، يتم إضافة الكائنات الحية الدقيقة بشكل تسلسلي إلى المصل، والتي تشمل: مستضدات المجموعة(طريقة كاستيلاني). تنتج هذه الطريقة أمصال ممتزة تحتوي على أجسام مضادة لها نوع معينميكروب

طرق تفاعل التراص.الأكثر شيوعًا هي الصفائحية (التقريبية) والموسعة RA.

يتم وضع لوحة RA على الزجاج. في هذا التفاعل، يتم استخدام الأمصال المخففة قليلاً أو غير المخففة. استخدامه كما طريقة معجلةالكشف عن الأجسام المضادة أو تحديد الكائنات الحية الدقيقة. يتم وضع قطرة من المصل على الزجاج، حيث يتم إدخال ثقافة بكتيرية غير معروفة في حلقة، ويتم خلطها، وبعد 2-3 دقائق يتم ملاحظة ظهور تراص ناعم الحبيبات أو قشاري. يتم استخدام قطرة للسيطرة محلول ملحيحيث يتم ملاحظة التعكر بعد إدخال البكتيريا. عند استخدام الأمصال غير الممتزة، يكون التفاعل على الزجاج إرشاديًا فقط.

يتم تنفيذ RA الموسع في أنابيب الاختبار أو الآبار اللوحية. في هذه الحالة، يتم تخفيف المصل التشخيصي إلى عيار وإضافة كميات متساوية من المستضد. إذا كانت النتيجة إيجابية، تتشكل رواسب سائبة على شكل "مظلة" في قاع أنبوب الاختبار، وإذا كانت النتيجة سلبية، تتشكل رواسب على شكل "زر". نظرًا لأن عيار الأجسام المضادة الخاصة بالمجموعة في المصل أقل بكثير من عيار الأجسام المضادة الخاصة بالأنواع، يتم ملاحظة التفاعلات الجماعية فقط في التخفيفات الصغيرة من المصل. إذا حدث التراص قبل عيار المصل أو ما يصل إلى نصف عيار المصل، فهو خاص بالنوع.

لتحديد الأجسام المضادة في مصل المريض (التشخيص المصلي)، يتم استخدام التشخيص الميكروبي القياسي، الذي يحتوي على معلق من الميكروبات المعروفة أو مستضداتها. في هذه الحالة، من الممكن أيضًا تثبيت اللوحة ونشر RA.

رد فعل تراص الخلايا المباشر. لتحديد فصائل الدم، يتم استخدام أمصال دم قياسية من المتبرعين تحتوي على أجسام مضادة معروفة لـ A أو B. يتم إجراء التفاعلات على الزجاج أو الألواح. إذا كانت كريات الدم الحمراء تحتوي على A (فصيلة الدم الثانية)، أو B (فصيلة الدم الثالثة) أو كلا المستضدات (فصيلة الدم الرابعة)، فإن الأمصال المقابلة تلتصق بكريات الدم الحمراء. يتم أيضًا استخدام اختبار توافق الدم، حيث يتم خلط قطرات الدم من المتبرع والمتلقي وتقييم التراص.

تستخدم العيادات تفاعل تراص الكريات البيض والصفائح الدموية والخلايا الأخرى لتحديد الأجسام المضادة الذاتية، وكذلك لتحديد المستضدات الموجودة على هذه الخلايا.

يعتمد تفاعل التراص الدموي على ظاهرة التصاق خلايا الدم الحمراء، والتي تحدث تحت تأثير عوامل مختلفة. هناك التراص الدموي المباشر وغير المباشر.
في تفاعل التراص الدموي المباشر، تلتصق خلايا الدم الحمراء معًا عندما يتم امتصاص مستضدات معينة، مثل الفيروسات، عليها.

تفاعل التراص الدموي غير المباشر (السلبي) (IRHA، RPHA)يعتمد على استخدام كريات الدم الحمراء (أو اللاتكس) مع المستضدات أو الأجسام المضادة الممتزة على سطحها، والتي يؤدي تفاعلها مع الأجسام المضادة المقابلة أو المستضدات في مصل دم المريض إلى التصاق كريات الدم الحمراء ببعضها البعض وسقوطها إلى قاع الدم. أنبوب اختبار أو خلية على شكل رواسب صدفية.

عناصر.لإجراء RNGA، يمكن استخدام كريات الدم الحمراء من الأغنام والخيول والأرانب والدجاج والفئران والبشر وغيرها، والتي يتم تخزينها للاستخدام المستقبلي عن طريق معالجتها بالفورمالدهيد أو الجلوتارالدهيد. تزداد قدرة كريات الدم الحمراء على الامتزاز عندما يتم معالجتها بمحلول التانين أو كلوريد الكروم.

يمكن أن تكون المستضدات في RNGA مستضدات عديد السكاريد للكائنات الحية الدقيقة، ومستخلصات اللقاحات البكتيرية، ومستضدات الفيروسات والريكتسيات، بالإضافة إلى مواد أخرى.

تسمى خلايا الدم الحمراء المتأثرة بارتفاع ضغط الدم بتشخيصات كريات الدم الحمراء. لتحضير تشخيص كريات الدم الحمراء، يتم استخدام كريات الدم الحمراء في الأغنام، والتي لها نشاط امتصاص عالي، في أغلب الأحيان.

طلب. يستخدم RNGA لتشخيص الأمراض المعدية، وتحديد هرمون الغدد التناسلية في البول عند إثبات الحمل، لتحديد الحساسية المتزايدة الأدويةوالهرمونات وفي بعض الحالات الأخرى.

في الدراسات المصلية، يتم استخدام تفاعل تثبيط التراص الدموي المباشر، عندما يتم تحييد الفيروس المعزول من المريض بمصل مناعي محدد ثم دمجه مع خلايا الدم الحمراء. يشير غياب التراص الدموي إلى تماسك الفيروس والمصل المناعي المستخدم.

يتم ملاحظة تفاعل التراص الدموي غير المباشر (التراص الدموي السلبي) في الحالات التي يتم فيها إضافة مصل مناعي أو مصل مريض يحتوي على أجسام مضادة مناسبة إلى خلايا الدم الحمراء التي تم علاجها (توعية) مسبقًا بمستضدات مختلفة. يحدث التصاق محدد لخلايا الدم الحمراء، والتراص الدموي السلبي.

يتفوق تفاعل التراص الدموي غير المباشر أو السلبي في الحساسية والنوعية على الطرق المصلية الأخرى، ويستخدم في تشخيص الالتهابات التي تسببها البكتيريا، والريكتسيا، والأوالي.

تتكون طريقة إجراء تفاعل التراص الدموي غير المباشر من عدة مراحل.

· أولاً، يتم غسل خلايا الدم الحمراء بمحلول كلوريد الصوديوم متساوي التوتر، ثم، إذا لزم الأمر (عند استخدام المستضدات البروتينية)، يتم معالجتها بمحلول التانين 1: 20000 ويتم توعيتها بمستضدات قابلة للذوبان.

· بعد الغسل بمحلول كلوريد الصوديوم متساوي التوتر، يصبح مستضد كريات الدم الحمراء جاهزًا للاستخدام.

· يتم تخفيف أمصال الاختبار بمحلول متساوي التوتر من كلوريد الصوديوم في أنابيب اختبار أو ألواح بلاستيكية خاصة ذات فتحات، ثم يضاف تشخيص كريات الدم الحمراء إلى كل تخفيف للمصل.

· تراعى نتائج تفاعل التراص الدموي غير المباشر حسب طبيعة رواسب خلايا الدم الحمراء المتكونة في قاع أنبوب الاختبار.

· تعتبر نتيجة التفاعل التي تغطي فيها خلايا الدم الحمراء الجزء السفلي بالكامل من أنبوب الاختبار بالتساوي إيجابية. في رد الفعل السلبي، توجد خلايا الدم الحمراء على شكل قرص صغير أو “زر” في منتصف الجزء السفلي من أنبوب الاختبار.

· بعد ساعتين من الحضانة عند 37 درجة مئوية، يتم أخذ النتائج بعين الاعتبار وتقييمها مظهررواسب كريات الدم الحمراء (دون اهتزاز): مع رد فعل سلبي تظهر الرواسب على شكل قرص مضغوط أو حلقة في قاع البئر، مع رد فعل إيجابي- رواسب مزركشة مميزة من كريات الدم الحمراء، وهي طبقة رقيقة ذات حواف غير مستوية

رد فعل التخثر.

يعتمد رد الفعل هذا على خاصية فريدة من نوعهاترتبط المكورات العنقودية الذهبية، التي تحتوي على البروتين A في جدارها الخلوي، بأجزاء Fc من IgG وIgM.

في هذه الحالة، تبقى المراكز النشطة للأجسام المضادة حرة ويمكن أن تتفاعل مع محددات محددة للمستضدات. يتم وضع قطرة من معلق 2% من المكورات العنقودية، المحسسة بالأجسام المضادة المناسبة، على شريحة زجاجية، وتضاف قطرة من معلق البكتيريا قيد الدراسة. إذا تطابق المستضد مع الأجسام المضادة، يحدث تراص واضح للمكورات العنقودية المحملة بالأجسام المضادة خلال 30-60 ثانية.

متطلبات المصل المناعي المستخدم لتوعية خلايا المكورات العنقودية وإجراء عملية التحسس. للحصول على كاشف تخثر، يجب معالجة معلق المكورات العنقودية بمصل مناعي ضد المستضد المطلوب. يجب أن يؤخذ المصل من حيوان IgG لديه تقارب للبروتين A. الغلوبولين المناعي للإنسان والخنازير والكلاب والخنازير الغينية لديه أكبر تقارب له، على الأقل - الحمير والأرانب، وIgG للأغنام والخيول، ويتفاعل معه الجرذان والفئران بشكل ضعيف جداً.

بالإضافة إلى الخصوصية الصارمة للمستضد المطلوب، يجب ألا يحتوي المصل المستخدم في RCOA على أجسام مضادة للمكورات العنقودية لتجنب تراص كاشف المكورات العنقودية بسبب التأثير المحدد للمستضد والأجسام المضادة، والتي يجب استبعادها في بروتين IgG نظام. يتم التحكم عن طريق خلط قطرة واحدة من المصل ومعلق كاشف المكورات العنقودية بنسبة 10٪ على كوب. إذا لم تتشكل أي رقائق متراصة بعد 3...5 دقائق، فإن المصل يعتبر مناسبًا للتفاعل.

إذا كانت عينات المصل المتوفرة لهذا المستضد تتراص المكورات العنقودية، فيمكن امتصاصها عن طريق تعليق خلايا المكورات العنقودية التي لا تحتوي على البروتين A (على سبيل المثال، سلالات Wood-46). وبهذه الطريقة، تتم إزالة الأجسام المضادة التي تتفاعل مع المكورات العنقودية بسبب شظايا Fab.

وبالتالي، فإن المصل المستخدم لتحضير كاشف التخثر يجب أن يلبي المتطلبات التالية:

• تم الحصول عليها من حيوان منتج لديه IgG انجذاب للبروتين A؛
• يجب أن يكون لديك خصوصية للمستضد المطلوب؛
• أن تكون خالية من الأجسام المضادة للمكورات العنقودية.

· إعداد التشخيص. يتم دمج كاشف المكورات العنقودية المحضر بنسبة 10% مع كمية متساوية من مصل المناعة في تخفيف العمل الأمثل المحدد مسبقًا. يتم رج الخليط لمدة 60 دقيقة عند 40...42 درجة مئوية في جهاز الإغلاق بمعدل 90 ذبذبة في الدقيقة. بعد ذلك، بعد 15 دقيقة، يتم غسلها مرتين باستخدام PBS، ثم إعادة تعليقها إلى معلق 2% وحفظها باستخدام ميرثيولات الصوديوم (1: 10000).

الصفحة الرئيسية → التحليلات → الطريقة المناعية → تفاعلات التراص الدموي (الطريقة المناعية)

تفاعلات التراصتعتمد على تفاعل الكاشف (الأجسام المضادة) مع المستضدات الموجودة على سطح الخلايا أو الجزيئات الأجنبية. ونتيجة لذلك تتشكل كتل كبيرة تترسب ويمكن رؤيتها حتى بالعين المجردة. وبهذه الطريقة يتم تحديد فصيلة الدم وفقًا لنظام ABO، ووجود عامل Rh فيها، وما إلى ذلك. وهذه طريقة تشخيصية أكثر حساسية مقارنة بتفاعلات الترسيب، نظرًا لأن حجم الرواسب (التراص) يتجاوز حجم ترسب.

التراص الدموي المباشر

يستخدم تفاعل التراص الدموي المباشر (DHR) للكشف عن المستضدات السطحية للكائنات الحية الدقيقة وخلايا الدم الحمراء، وكذلك الأجسام المضادة لها.
ل الأمصال القياسيةالتي تحتوي على أجسام مضادة، تضاف مادة الاختبار (الدم). ترتبط سرعة تفاعل التراص المباشر بكمية المادة التي يتم اختبارها، وكمية المصل وتركيزه، ودرجة الحرارة المحيطة.

التراص الدموي غير المباشر

يتم إجراء تفاعل التراص الدموي غير المباشر للكشف عن الأجسام المضادة في دم المريض باستخدام جهاز تشخيص كريات الدم الحمراء. يتكون الكاشف من خلايا الدم الحمراء التي يوجد على سطحها مستضد (بروتينات الكائنات الحية الدقيقة والسموم والمواد المسببة للحساسية وما إلى ذلك).
يتم تخفيف مصل دم المريض بمحلول كلوريد الصوديوم بنسبة 0.9%، ثم يتم إضافة تشخيص كريات الدم الحمراء ومراقبة النتيجة. تكتشف طريقة التشخيص الحساسة للغاية هذه المستضدات حتى في التركيزات الصغيرة.

تفاعل التراص الدموي (HRA).

في المختبر، يتم استخدام تفاعلين من تفاعلات التراص الدموي مع آليات عمل مختلفة.

أول RGA مصلي. في هذا التفاعل، يتم تراص خلايا الدم الحمراء عند التفاعل مع الأجسام المضادة المناسبة (الهيماجلوتينين). يستخدم التفاعل على نطاق واسع لتحديد فصائل الدم.

RGA الثاني ليس مصليا. في ذلك، لا يحدث التصاق خلايا الدم الحمراء

الأجسام المضادة، ولكن المواد الخاصة التي تشكلها الفيروسات. على سبيل المثال، يقوم فيروس الأنفلونزا بتجميع خلايا الدم الحمراء في الدجاج و خنازير غينيا- فيروس شلل الأطفال - خلايا الدم الحمراء في الأغنام. هذا التفاعل يجعل من الممكن الحكم على وجود فيروس معين في المادة قيد الدراسة.

يتم التفاعل في أنابيب اختبار أو على ألواح خاصة ذات آبار. يتم تخفيف المادة التي تم اختبارها لوجود الفيروس بمحلول متساوي التوتر من 1:10 إلى 1:1280؛ يتم خلط 0.5 مل من كل تخفيف مع كمية متساوية من 1-2% من معلق خلايا الدم الحمراء. في السيطرة، يتم خلط 0.5 مل من كريات الدم الحمراء مع 0.5 مل محلول متساوي التوتر. توضع أنابيب الاختبار في منظم الحرارة لمدة 30 دقيقة، وتترك الألواح في درجة حرارة الغرفة لمدة 45 دقيقة.

المحاسبة عن النتائج.إذا كان رد الفعل إيجابيًا، تظهر رواسب من خلايا الدم الحمراء ذات حواف صدفية ("مظلة") في قاع أنبوب الاختبار أو البئر، وتغطي قاع البئر بالكامل. إذا كانت النتيجة سلبية، فإن خلايا الدم الحمراء تشكل رواسب كثيفة ذات حواف ناعمة ("الزر"). يجب أن تكون نفس الرواسب في السيطرة. يتم التعبير عن شدة التفاعل بعلامة "+".

رد فعل التراص الدموي

عيار الفيروس هو الحد الأقصى لتخفيف المادة التي يحدث فيها التراص.

رد فعل تثبيط التراص الدموي

هذا التفاعل المصلي، حيث تقوم الأجسام المضادة المضادة للفيروسات المحددة، التي تتفاعل مع الفيروس (المستضد)، بتحييده وحرمانه من القدرة على تراص خلايا الدم الحمراء، أي منع تفاعل التراص الدموي. يتيح لك هذا التفاعل تحديد نوع ونوع الفيروسات.

إعداد رد الفعل.يتم خلط 0.25 مل من المصل المضاد للفيروسات مع كمية متساوية من المادة التي تحتوي على الفيروس. يرج الخليط ويوضع في منظم الحرارة لمدة 30 دقيقة، وبعد ذلك يضاف 0.5 مل من معلق خلايا الدم الحمراء 1-2%.

المحاسبة عن النتائج.في تحديد المواقع الصحيحخبرة في مراقبة المصل وكريات الدم الحمراء، يجب أن يتشكل "زر" - لا يوجد عامل تراص كريات الدم الحمراء؛ في السيطرة على المستضد، يتم تشكيل "مظلة" - تسبب الفيروس في تراص خلايا الدم الحمراء. إذا كان المصل متماثلًا للفيروس قيد الدراسة، فسيتم تشكيل "زر" - حيث يقوم المصل بتحييد الفيروس.

رد فعل التراص الدموي غير المباشر

يعتمد تفاعل التراص الدموي غير المباشر (السلبي) (RIHA) على حقيقة أن خلايا الدم الحمراء، إذا تم امتصاص مستضد قابل للذوبان على سطحها، تكتسب القدرة على التراص عند التفاعل مع الأجسام المضادة للمستضد الممتز.

إعداد رد الفعل.يتم تسخين المصل لمدة 30 دقيقة عند 56 درجة مئوية، ويتم تخفيفه بالتتابع بنسبة 1:10 - 1:1280 ويصب في 0.25 مل في أنابيب الاختبار أو الآبار، حيث يتم بعد ذلك وضع قطرتين من خلايا الدم الحمراء مع المستضدات الممتزة عليها. وأضاف.

ضوابط:تعليق كريات الدم الحمراء مع المستضدات الممتزة عليها بمصل مناعي واضح، تعليق كريات الدم الحمراء مع المستضدات الممتزة عليها بالمصل الطبيعي؛ تعليق خلايا الدم الحمراء الطبيعيةمع مصل الاختبار. في التحكم الأول، يجب أن يحدث التراص، في الثانية والثالثة لا ينبغي أن يحدث.

أسئلة التحكم.

1. ما الذي تشير إليه نتيجة تحليل الأشعة السينية الإيجابية بين خلايا الدم الحمراء والمادة التي يتم فحصها لوجود الفيروس؟

2. هل سيحدث تفاعل تراص لخلايا الدم الحمراء إذا أضيف إليها الفيروس والمصل المقابل له؟ ما اسم التفاعل الذي يكشف هذه الظاهرة؟

العمل العملي رقم 12.

رد فعل التثبيت المكمل.

يعتمد تفاعل تثبيت المتمم (FFR) على حقيقة أن مركب جسم مضاد محدد يمتص دائمًا (يربط) المكمل لنفسه.

يستخدم هذا التفاعل على نطاق واسع في تحديد المستضدات والتشخيص المصلي للعدوى، وخاصة الأمراض التي تسببها اللولبيات (تفاعل فاسرمان)، والريكتسيا والفيروسات.

RKS هو تفاعل مصلي معقد. أنها تنطوي على نظامين مكملين وجسم مضاد للمستضد. في الأساس، هذين هما التفاعلان المصليان.

يتكون النظام الرئيسي الصحيح من مستضد وجسم مضاد (أحدهما معروف والآخر غير معروف). يتم إضافة كمية معينة من المكملات إليه. إذا تطابق المستضد والجسم المضاد لهذا النظام، فسوف يتصلان ويربطان مجاملة. المجمع الناتج مشتت بدقة وغير مرئي.

تم الكشف عن تكوين هذا المجمع باستخدام نظام انحلالي أو نظام مؤشر ثانٍ. ويشمل خلايا الدم الحمراء للأغنام (المستضد) والمصل الانحلالي المقابل (الجسم المضاد)، أي. مجمع المناعي الجاهز. في هذا النظام، لا يمكن أن يحدث تحلل خلايا الدم الحمراء إلا في وجود المكمل. إذا كان المكمل مرتبطًا بالنظام الأول، فلن يكون هناك انحلال للدم في النظام الثاني، لأن لا يوجد تكملة مجانية. يتم تسجيل غياب انحلال الدم (محتويات الأنبوب غائمة أو وجود رواسب من كريات الدم الحمراء في الأسفل) كنتيجة RSC إيجابية.

إذا كان المستضد في النظام الأول لا يتوافق مع الجسم المضاد، فلن يتشكل المركب المناعي وسيظل المكمل حرًا. تبقى المجاملة حرة، وتشارك في النظام الثاني، مما يسبب انحلال الدم، وتكون نتيجة RSC سلبية (محتويات الأنابيب شفافة - "الدم المطلي").

مكونات تفاعلات التثبيت المكملة:

1. المستضد - عادة المحللة، استخراج، الناشب،

في كثير من الأحيان تعليق الكائنات الحية الدقيقة.

2. الأجسام المضادة - مصل المريض.

3. المكمل - مصل خنزير غينيا.

4. المستضد - كريات الدم الحمراء في الأغنام.

5. الأجسام المضادة - الهيموليزين إلى كريات الدم الحمراء في الأغنام.

6. محلول متساوي التوتر.

بسبب حقيقة أن RSK تشارك عدد كبير منمكونات معقدة،

يجب أولاً معايرتها وإدخالها في التفاعل بكميات محددة وبأحجام متساوية: 0.5 أو 0.25، وفي كثير من الأحيان 0.2 أو 1.25 أو 1.0 مل (الأحجام الأكبر تعطي نتيجة أكثر دقة). يتم إجراء معايرة مكونات التفاعل بنفس حجم التجربة، مع استبدال المكونات المفقودة بمحلول متساوي التوتر.

معلومات ذات صله:

البحث في الموقع:

يعد اختبار التراص الدموي غير المباشر أو السلبي (IRHA أو RPHA) أكثر حساسية وتحديدًا من اختبار التراص. يستخدم رد الفعل هذا أيضًا في اتجاهين.

1) للكشف عن الأجسام المضادة في مصل دم المريض، يتم استخدام تشخيصات كريات الدم الحمراء، حيث يتم امتصاص المستضد على سطح كريات الدم الحمراء المعالجة بالتانين. فيما يتعلق برد الفعل هذا، يُستخدم مصطلح RPGA في أغلب الأحيان.

يتم تخفيف مصل الاختبار في آبار الألواح البلاستيكية ويتم إضافة تشخيص كريات الدم الحمراء. مع رد الفعل الإيجابي تظهر طبقة رقيقة على طول جدران الحفرة على شكل "مظلة من الدانتيل"، ومع رد الفعل السلبي تظهر رواسب كثيفة من كريات الدم الحمراء على شكل "زر".

2) للكشف عن السموم والمستضدات البكتيرية في المادة قيد الدراسة، يتم استخدام تشخيصات كريات الدم الحمراء للأجسام المضادة، والتي يتم الحصول عليها عن طريق امتزاز الأجسام المضادة على كريات الدم الحمراء. فيما يتعلق برد الفعل هذا، يتم استخدام مصطلح RNGA في كثير من الأحيان. على سبيل المثال، بمساعدة تشخيص الأجسام المضادة، يتم الكشف عن مستضد عصية الطاعون، والسموم الخارجية للدفتيريا، والسموم الخارجية للبوتولينوم.

ما هو تشخيص كريات الدم الحمراء؟ ما هو تشخيص الأجسام المضادة لكرات الدم الحمراء؟

تشخيصات كريات الدم الحمراء هي خلايا دم حمراء (تُعالج بالتانين أو الفورمالين) مع مستضدات مستخرجة من البكتيريا الممتصة عليها، وتستخدم في تفاعلات التراص الدموي السلبي (RPHA). في حالة استخدام RPGA للكشف عن المستضد في إفرازات المرضى، في الأنسجة، وما إلى ذلك، يتم استخدام "تشخيصات الأجسام المضادة"، أي خلايا الدم الحمراء الحساسة للأجسام المضادة.

في RNGA، يتم الكشف عن الأجسام المضادة في مصل الدم باستخدام تشخيص كريات الدم الحمراء المستضدية، وهي كريات الدم الحمراء التي تحتوي على مستضدات ممتصة عليها.

منهجية إعداد ردود الفعل. رد فعل التخثر.

- تثبيت خلايا الدم الحمراء بالفورمالدهيد أو الألدهيدات الجلوتارية أو الأكريليكية. يتم تخزين خلايا الدم الحمراء المعالجة هذه لفترة طويلة. في كثير من الأحيان، يتم استخدام كريات الدم الحمراء من الأغنام والبشر والدجاج وما إلى ذلك لهذا الغرض؛
- علاج كريات الدم الحمراء الثابتة بمحلول التانين. ونتيجة لذلك، تكتسب خلايا الدم الحمراء القدرة على امتصاص البروتينات (الفيروسات والأجسام المضادة) الموجودة على سطحها بشكل لا رجعة فيه؛
- تحسس كريات الدم الحمراء التانيزية بالفيروسات أو الأجسام المضادة.

تفاعل التراص (CAR)

يتم استخدام تفاعل التخثر لتحديد المستضدات باستخدام الأجسام المضادة الممتصة على البروتين A في خلايا المكورات العنقودية (تشخيص الأجسام المضادة).
البروتين A لديه تقارب لجزء Fc من الغلوبولين المناعي، وبالتالي فإن هذه البكتيريا المعالجة بمصل التشخيص المناعي تمتز بشكل غير محدد الأجسام المضادة في المصل، والتي تتفاعل بعد ذلك مع المراكز النشطة مع الميكروبات المقابلة المعزولة من المرضى. نتيجة للتخثر، يتم تشكيل رقائق تتكون من المكورات العنقودية والأجسام المضادة في المصل التشخيصي والميكروب المكتشف.

الأمصال الملتصقة: ما تحتويه؛ كيف يتم الحصول عليها، وفيما يتم استخدامها؛ ما هو عيار المصل المتراص؟

يتم الحصول على المصل المتراص عن طريق تحصين الأرانب (عن طريق الوريد أو تحت الجلد أو داخل الصفاق) بمعلق من البكتيريا الميتة، بدءاً بجرعة 200 مليون، ثم 500 مليون، و1 مليار، و2 مليار جسم ميكروبي في 1 مل، على فترات 5 أيام. وبعد 7-8 أيام من آخر تطعيم، يتم أخذ الدم وتحديد عيار الأجسام المضادة.

عيار المصل المتراص هو الحد الأقصى للتخفيف من المصل الذي يحدث عنده التراص مع الكائنات الحية الدقيقة المقابلة.

تُستخدم الأمصال التراصية لتحديد الميكروبات في تفاعل التراص واسع النطاق.

تفاعل التراص الدموي (HRA)

إذا كانت الكائنات الحية الدقيقة قيد الدراسة ملتصقة بالمصل إلى العيار أو إلى نصف قيمة العيار، فيمكن اعتبارها تنتمي إلى الأنواع التي يشار اسمها إلى ملصق الأمبولة.

ما هي الاختلافات بين الأمصال المتراصة متعددة التكافؤ وأحادية التكافؤ (أحادية المستقبل)؟ لماذا يؤدي تحصين الأرنب بميكروبات من نوع واحد إلى إنتاج مصل يحتوي على أجسام مضادة لعدة مستضدات؟

الأمصال أحادية المستقبل هي أمصال تحتوي على أجسام مضادة لمستضد واحد فقط، وأمصال متعددة التكافؤ تعطي تفاعلات تراص مع اثنين أو ثلاثة من البكتيريا ذات الصلة التي لها مستضد مشترك. تستخدم الأمصال التراصية لتحديد الكائنات الحية الدقيقة في تفاعل التراص. عيب هذه الأمصال هو أنها قادرة على إعطاء تفاعلات تراص جماعية، لأن أنها تحتوي على أجسام مضادة للبكتيريا التي لها مستضدات مشتركة.

رد فعل التراص الدموي. الوصف والتطبيق

يعتمد ذلك على حقيقة أن خلايا الدم الحمراء، التي تم امتصاص المستضدات عليها سابقًا، تكتسب القدرة على التراص في وجود الأمصال المتماثلة (الأجسام المضادة).

في هذه الحالة، تعمل خلايا الدم الحمراء كحاملات بمحددات محددة، والتي يحدث تراصها نتيجة تفاعل المستضد + الجسم المضاد.

تسمى خلايا الدم الحمراء التي ترتبط المستضدات بقوة بسطحها بتشخيص مستضد كريات الدم الحمراء، أو كريات الدم الحمراء الحساسة للمستضد.

نوع آخر من RNGA - يتم امتصاص الأجسام المضادة على سطح كريات الدم الحمراء ويحدث تراصها اللاحق في وجود مستضد متماثل. في هذه الحالة، تسمى كريات الدم الحمراء هذه تشخيص الأجسام المضادة لكريات الدم الحمراء، أو كريات الدم الحمراء المتحسسة بالأجسام المضادة.

واستنادا إلى هذين النهجين المنهجيين الأساسيين، تم تطوير واستخدام العديد من التعديلات على RNGA. وبالتالي، يتم استخدام جزيئات اللاتكس القياسية الصغيرة كحاملات. في هذه الحالة، يسمى التفاعل تفاعل تراص اللاتكس (RLA) أو يتم استخدامه المكورات العنقودية الذهبية- تفاعل التراص، وما إلى ذلك. عادة، يتم إعداد تشخيصات كريات الدم الحمراء في مؤسسات الصناعة البيولوجية، ويتم تنفيذ الخبرة الرئيسية لـ RNGA في مختبرات التشخيص.

يتضمن إعداد تشخيص كريات الدم الحمراء الخطوات التالية:

• تثبيت خلايا الدم الحمراء بالفورمالدهيد أو الألدهيدات الجلوتاريكية أو الأكريليكية. يتم تخزين خلايا الدم الحمراء المعالجة هذه لفترة طويلة. في كثير من الأحيان، يتم استخدام كريات الدم الحمراء من الأغنام والبشر والدجاج وما إلى ذلك لهذا الغرض؛
• علاج كريات الدم الحمراء الثابتة بمحلول التانين. ونتيجة لذلك، تكتسب خلايا الدم الحمراء القدرة على امتصاص البروتينات (الفيروسات والأجسام المضادة) الموجودة على سطحها بشكل لا رجعة فيه؛
• تحسس كريات الدم الحمراء التانيزية بواسطة الفيروسات أو الأجسام المضادة.

تجدر الإشارة إلى أن طرق إعداد تشخيصات كريات الدم الحمراء للعدوى الفيروسية مختلفة.

الإجراء الخاص بإجراء RNGA للكشف عن عيار الجسم المضاد وتحديده هو كما يلي:

• تضاف جرعات متساوية من كريات الدم الحمراء المتحسسة بالمستضد إلى التخفيفات المتتالية من المصل؛
• يُترك الخليط لمدة 2-3 ساعات عند درجة حرارة الغرفة أو لمدة 16-18 ساعة عند 4 درجات مئوية؛
• تأخذ في الاعتبار النتائج. إذا كان المصل يحتوي على أجسام مضادة للفيروس الذي تم تحسس خلايا الدم الحمراء به، يتم ملاحظة التراص الدموي، والذي يتم تقييمه بالتهجين.

يعتبر عيار الجسم المضاد الموجود في المصل هو أعلى تخفيف في المصل والذي لا يزال يوفر التراص الدموي بواسطة تهجينين على الأقل.

ويرافق RNGA جميع الضوابط ذات الصلة. عادةً ما يتم التفاعل باستخدام الطريقة الدقيقة.

يتيح لك RNGA حل المشكلات التشخيصية التالية:

• الكشف عن الأجسام المضادة وتحديد عيارها في مصل الدم باستخدام تشخيص مستضد كريات الدم الحمراء المعروف؛
• اكتشاف وتحديد فيروس غير معروف باستخدام تشخيص الأجسام المضادة المعروفة لكرات الدم الحمراء.

مزايا RNGA: الحساسية العالية، وبساطة تقنية التنسيب، وسرعة الاستجابة. ومع ذلك، من المهم ملاحظة أنه تنشأ صعوبات كبيرة في إعداد تشخيصات خلايا الدم الحمراء المستقرة ( اعتماد كبيرعلى نقاء المكونات المستخدمة، والحاجة إلى اختيار طريقة التثبيت، تانيزيشن وتوعية كريات الدم الحمراء لكل نوع من الفيروسات).

إذا وجدت خطأ، فيرجى تحديد جزء من النص والضغط على Ctrl+Enter.

في تواصل مع