Действующий
МУК 4.2.2939-11
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
4.2. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. БИОЛОГИЧЕСКИЕ И МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ
ФАКТОРЫ
Порядок организации и проведения лабораторной диагностики туляремии для лабораторий территориального, регионального и федерального уровней
Дата введения: с момента утверждения
1. Разработаны
Федеральным казенным учреждением здравоохранения "Российский
научно-исследовательский противочумный институт "Микроб"
Роспотребнадзора (В.В.Кутырев, И.Н.Шарова, Н.А.Осина, Е.С.Казакова,
Е.А.Плотникова, С.А.Пионтковский, Т.Ю.Красовская, Д.В.Уткин,
С.А.Щербакова); Федеральным казенным учреждением здравоохранения
"Иркутский научно-исследовательский противочумный институт"
Роспотребнадзора (С.В.Балахонов, Т.И.Иннокентьева, М.В.Чеснокова,
А.В.Мазепа, С.А.Татарников); Федеральным казенным учреждением
здравоохранения "Ставропольский научно-исследовательский
противочумный институт" Роспотребнадзора (А.Н.Куличенко,
О.В.Малецкая, Т.В.Таран, А.П.Бейер, А.В.Таран); Федеральным
казенным учреждением здравоохранения "Волгоградский
научно-исследовательский противочумный институт" Роспотребнадзора
(В.В.Алексеев, А.В.Липницкий, В.А.Антонов, Д.В.Викторов);
Федеральным казенным учреждением здравоохранения
"Ростовский-на-Дону научно-исследовательский противочумный
институт" Роспотребнадзора (Н.В.Павлович, Н.Л.Пичурина,
Н.В.Аронова, Н.Н.Оноприенко, М.В.Цимбалистова, А.С.Водопьянов);
Федеральным казенным учреждением здравоохранения "Противочумный
центр" Роспотребнадзора (В.Е.Безсмертный, С.М.Иванова); Федеральным
бюджетным учреждением здравоохранения "Федеральный центр гигиены и
эпидемиологии" Роспотребнадзора (В.Г.Сенникова, М.В.Зароченцев,
В.В.Мордвинова); Федеральным государственным учреждением науки
"Государственный научный центр прикладной микробиологии и
биотехнологии" Роспотребнадзора (И.А.Дятлов, А.Н.Мокриевич,
С.Ф.Бикетов, М.В.Храмов, Н.И.Лунева); Федеральным государственным
бюджетным учреждением "ГИСК им. Л.А.Тарасевича" Минздравсоцразвития
(И.В.Борисевич, Л.В.Саяпина).
3. Утверждены
Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав
потребителей и благополучия человека, Главным государственным
санитарным врачом Российской Федерации Г.Г.Онищенко 14 июля 2011
г.
1. Область применения
1. Область применения
1.1. Настоящие
методические указания определяют порядок организации и проведения
лабораторной диагностики туляремии для лабораторий
территориального, регионального и федерального уровней, формы и
методы их взаимодействия, номенклатуру и объем исследования,
требования к лабораториям, специалистам и персоналу, участвующим в
выполнении исследований, материально-техническому обеспечению
исследований, к биологической безопасности проведения работ.
1.2. Настоящие
методические указания предназначены для специалистов
бактериологических лабораторий учреждений, осуществляющих
государственный санитарно-эпидемиологический надзор за туляремией в
Российской Федерации, лечебно-профилактических и противочумных
учреждений.
2. Нормативные ссылки
2.1. Федеральный закон от
3*.03.1999 N 52-ФЗ
"О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения" .
______________
Федеральный
закон от 30.03.1999 N 52-ФЗ "О санитарно-эпидемиологическом
благополучии населения" . - Примечание изготовителя базы
данных.
2.2. Постановление Правительства Российской
Федерации от 29.10.2007 N 720* "О внесении изменений в пункт 5
Положения о лицензировании деятельности, связанной с использованием
возбудителей инфекционных заболеваний ", утвержденного постановлением
Правительства Российской Федерации от 22.01.2007 N 31* .
________________
*
Документ утратил силу на основании постановления
Правительства Российской Федерации от 16 апреля 2012 года N
317
2.3. Постановление
Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от
24.02.2009 N 11 "О представлении внеочередных донесений о
чрезвычайных ситуациях в области общественного здравоохранения
санитарно-эпидемиологического характера" (зарегистрировано в
Минюсте Российской Федерации 10.04.2009 N 13745).
2.4. Приказ
Министерства здравоохранения и социального развития Российской
Федерации от 7.07.2009 N 415н "Об утверждении квалификационных
требований к специалистам с высшим и послевузовским медицинским и
фармацевтическим образованием в сфере здравоохранения"
(зарегистрирован в Минюсте Российской Федерации 09.07.2009 N
14292).
2.6. СП
1.2.036-95 "Порядок учета, хранения, передачи и
транспортирования микроорганизмов I-IV групп патогенности" (утв.
постановлением
Госкомсанэпиднадзора Российской Федерации от 28.08.1995 N
14).
2.7. СП
3.1.7.2642-10 "Профилактика туляремии" (утв. постановлением
Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от
31.05.2010 N 61 "Об утверждении СП 3.1.7.2642-10" .
Зарегистрировано в Минюсте РФ 7.07.2010 N 7745).
2.8. СП
1.3.1285-03 "Безопасность работы с микроорганизмами I-II групп
патогенности (опасности)" (утв. постановлением
Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от
15.04.2003 N 42 "О введении в действие санитарно-эпидемиологических
правил СП 1.3.1285-03" . Зарегистрировано в Минюсте Российской
Федерации 10.05.2003 N 4545).
2.9. СП 1.3.1318-03*
"Порядок выдачи санитарно-эпидемиологического заключения о
возможности проведения работ с возбудителями инфекционных
заболеваний человека I-IV групп патогенности (опасности),
генно-инженерно-модифицированными микроорганизмами, ядами
биологического происхождения и гельминтами" (утв. постановлением
Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от
30.04.2003 N 85 "О введении в действие санитарно-эпидемиологических
правил СП 1.2.1318-03" . Зарегистрировано в Минюсте Российской
Федерации 19.05.2003 N 4558).
______________
*
Вероятно ошибка оригинала. Следует читать: СП
1.2.1318-03 . - Примечание изготовителя базы данных.
2.12. СП
3.4.2318-08 "Санитарная охрана территории Российской Федерации"
(утв. постановлением
Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от
22.01.2008 N 3 "Об утверждении санитарно-эпидемиологических правил
СП 3.4.2318-08" . Зарегистрировано в Минюсте Российской
Федерации 3.04.2008 N 11459).
2.13. СанПиН
2.1.7.2790-10 "Санитарно-эпидемиологические требования к
обращению с медицинскими отходами" (утв. постановлением
Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от
9.12.2010 N 163 . Зарегистрировано в Минюсте Российской
Федерации 17.02.2011 N 19871).
2.14. СанПиН
2.1.3.2630-10 "Санитарно-эпидемиологические требования к
организациям, осуществляющим медицинскую деятельность" (утв.
постановлением
Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от
18.05.2010 N 58 . Зарегистрировано в Минюсте Российской
Федерации 9.08.2010 N 18094).
2.15. Санитарные
правила по устройству, оборудованию и содержанию
экспериментально-биологических клиник (вивариев) (утв. главным
государственным санитарным врачом СССР от 6.04.73 N 1045-73).
2.16. МУ
3.1.2007-05 "Эпидемиологический надзор за туляремией".
2.17. МУ
3.3.2.2124-06 "Контроль диагностических питательных сред по
биологическим показателям для возбудителей чумы, холеры, сибирской
язвы, туляремии".
2.18. МУК
4.2.2316-08 "Методы контроля бактериологических питательных
сред".
2.19. МУ
1.3.2569-09 "Организация работы лабораторий, использующих
методы амплификации нуклеиновых кислот при работе с материалом,
содержащим микроорганизмы I-IV групп патогенности".
2.20. МУ
4.2.2495-09 "Определение чувствительности возбудителей опасных
бактериальных инфекций (чумы, сибирской язвы, холеры, туляремии,
бруцеллеза, сапа и мелиоидоза) к антибактериальным препаратам".
3. Перечень сокращений
ЛПС - липополисахарид
ЛПУ -
лечебно-профилактическое учреждение
ООИ - особо опасные
инфекции
СП -
санитарно-эпидемиологические правила
СанПиН -
санитарно-эпидемиологические правила и нормативы
МУ - методические
указания
ПБА - патогенный
биологический агент
МФА - метод
флуоресцирующих антител
ИФА - иммуноферментный
анализ
ПЦР - полимеразная цепная
реакция
РА - реакция
агглютинации
РНГА - реакция непрямой
гемагглютинации
РТНГА - реакции
торможения непрямой гемагглютинации
РНАт - реакция
нейтрализации антител
МИС -
магноиммуносорбенты
РЛА - реакция
латекс-агглютинации
ИХ -
иммунохроматография
ИХ-тест -
иммунохроматографический тест
4. Общие положения
Характеристика болезни
и возбудителя туляремии
Туляремия - зоонозная
системная природно-очаговая бактериальная инфекционная болезнь,
характеризующаяся симптомами общей интоксикации, лихорадкой,
воспалительными изменениями в области ворот инфекции, регионарным
лимфаденитом, склонностью к затяжному течению.
Основными резервуарами и
источниками возбудителя туляремии в естественных условиях являются
дикие животные (около 50 видов), главным образом различные виды
грызунов, и зайцы. На территории природных очагов туляремии могут
заражаться овцы, свиньи, крупный рогатый скот. Резервуаром и
переносчиками возбудителя являются также кровососущие
членистоногие: иксодовые и гамазовые клещи, комары, слепни, блохи.
Больной человек эпидемиологической опасности не представляет.
Как и для всех зоонозов,
для туляремии характерна множественность механизмов (аспирационный,
контактный, фекально-оральный, трансмиссивный), а также путей и
факторов передачи. В соответствии с Международной статистической
классификацией болезней и проблем, связанных со здоровьем (Десятый
пересмотр. Женева, 2003, (МКБ-10),
и по локализации основного патологического процесса различают
следующие формы туляремии:
А21.0 - ульцерогландулярную
(язвенно-бубонную);
А21.1 - окулогландулярную
(глазо-бубонную);
А21.2 - легочную;
А21.3 - желудочно-кишечную
(абдоминальную);
А21.7 - генерализованную;
А21.8 - другие формы туляремии
(ангинозно-бубонную);
5.1.1. Требования к лабораториям лечебно-профилактических учреждений, осуществляющим исследования на туляремию
Лечебно-профилактические
учреждения, лаборатории которых осуществляют диагностические
исследования на туляремию, должны иметь лицензию на осуществление
деятельности, связанной с использованием возбудителей III-IV групп
патогенности (опасности).
Лаборатории ЛПУ должны
иметь санитарно-эпидемиологическое заключение о возможности
проведения работ с микроорганизмами III-IV групп патогенности
(опасности) в соответствии с действующими СП о порядке выдачи
санитарно-эпидемиологического заключения о возможности проведения
работ с возбудителями инфекционных заболеваний человека I-IV групп
патогенности (опасности), генно-инженерно-модифицированными
микроорганизмами, ядами биологического происхождения и
гельминтами.
Учет, хранение, передача
и транспортирование выделенных культур холерных вибрионов
(подозрительных) должны осуществляться в соответствии с
действующими нормативными документами о порядке учета, хранения,
передачи и транспортирования микроорганизмов I-IV групп
патогенности.
Проведение исследований
на всех этапах - отбор проб, их хранение, доставка в лабораторию,
регистрация, порядок исследования, выдача результатов,
взаимодействие с учреждениями Роспотребнадзора - должно
соответствовать требованиям действующих нормативных и
распорядительных документов.
Исследования на туляремию
могут выполнять специалисты не моложе 18 лет с высшим и средним
медицинским, биологическим образованием, окончившие курсы
подготовки по специальности "Бактериология" с освоением методов
безопасной работы с возбудителями инфекционных болезней III-IV
групп патогенности (опасности), имеющие допуск к работе с ПБА
III-IV групп патогенности на основании приказа руководителя
учреждения. Специалисты, проводящие диагностические исследования на
туляремию, должны иметь необходимые профессиональные навыки в
соответствии с номенклатурой проводимых исследований (прилож.
8).
Специалисты,
осуществляющие деятельность, связанную с использованием
возбудителей инфекционных болезней, должны повышать квалификацию не
реже одного раза в пять лет и иметь сертификат специалиста.
Контроль качества
диагностических исследований на туляремию в лабораториях ЛПУ
включает:
Правила ведения
документации
Для забора материала и
проведения диагностических исследований на туляремию в
бактериологических лабораториях ЛПУ должны быть в наличии:
Персонал должен быть
обеспечен спецодеждой и средствами индивидуальной защиты (для
отбора проб клинического материала и проведения
иммуносерологических реакций).
5.1.2. Номенклатура и объем исследований
В
ЛПУ производят отбор клинического материала от лиц с подозрением на
туляремию, больных различными формами туляремии и вакцинированных,
а также секционного материала от умерших лиц.
В
бактериологических лабораториях ЛПУ проводят исследования сывороток
крови от больных туляремией и вакцинированных против туляремии лиц
иммуносерологическими и аллергологическим методами:
1) выявление антител в
парных сыворотках;
2) проведение реакции
лизиса лейкоцитов.
Врач-инфекционист ЛПУ
осуществляет оценку аллергологического статуса больных путем
постановки аллергической пробы с тулярином.
5.1.3. Порядок лабораторной диагностики туляремии в лабораториях лечебно-профилактических учреждений
Отбор и
транспортирование проб клинического материала
Материал от больных
забирает медицинский персонал ЛПУ при поступлении больного, до
начала лечения антибактериальными препаратами. Забор проб
осуществляют два медицинских работника, один из которых
врач-инфекционист или терапевт (хирург), подготовленный по вопросам
диагностики особо опасных инфекций и соблюдения требований
биологической безопасности при работе с клиническим материалом,
подозрительным на содержание возбудителей инфекционных болезней
I-II групп патогенности. Материал от вакцинированных лиц забирает
медицинский персонал ЛПУ
Секционный материал
забирают медицинские работники патолого-анатомических отделений
(или БСМЭ) в присутствии специалиста по особо опасным инфекциям,
руководствуясь действующими методическими указаниями по организации
и проведению первичных противоэпидемических мероприятий в случаях
выявления больного (трупа), подозрительного на заболевания
инфекционными болезнями, вызывающими чрезвычайные ситуации в
области санитарно-эпидемиологического благополучия населения, с
соблюдением регламентированных требований биологической
безопасности при работе с патогенными биологическими агентами I-II
групп.
Для направления в
бактериологические лаборатории учреждений Роспотребнадзора
забирают:
от больных людей в зависимости от
клинической формы болезни: содержимое бубона, материал из зева, с
конъюнктивы глаза, отделяемое язвы, мокроту, кровь;
от умерших людей: увеличенные лимфатические
узлы, измененные участки легких и селезенки, трахеи;
от вакцинированных людей: кровь.
Забор проб всех видов
материала осуществляют в стерильную стеклянную или пластиковую
посуду, соответствующую объему проб.
Пунктат из бубона
берут до 14-20 суток болезни шприцем емкостью не менее 5 мл. Кожу
на участке, намеченном для прокола, обрабатывают 70%-м спиртом, а
затем смазывают 5%-м раствором йода и вновь протирают 70%-м
спиртом. Иглу вводят с таким расчетом, чтобы ее острие достигло
центральной части бубона, после чего, оттянув до отказа поршень,
медленно вынимают иглу. Содержимое переносят в стерильную пробирку
с завинчивающейся пробкой. Можно перед взятием материала ввести в
бубон 0,3-0,5 мл стерильного 0,9%-го раствора натрия хлорида и
затем отобрать содержимое. При вскрывшемся бубоне забирают материал
отдельно из периферической плотной части и отделяемое свища.
Перед взятием
отделяемого язвы, папулы, везикулы или отторгнутого струпа
прединъекционной дезинфицирующей салфеткой осторожно очищают кожу
вокруг пораженного места, при необходимости стерильной марлевой
салфеткой удаляют некротические массы, гной. Прокатывая тампон по
раневой поверхности от центра к периферии в течение 5-10 с
абсорбируют материал на тампон. Тампон с материалом помещают в
пробирку или транспортную среду. При использовании шприца иглу
вводят у края везикулы (пустулы) и затем продвигают к середине. У
язв пунктируют плотный край.
Мокроту
собирают в
специальные широкогорлые контейнеры с завинчивающейся крышкой.
Отделяемое слизистой
зева
забирают натощак или через 3-4 ч после еды. Аккуратно
прижимая язык шпателем, вводят тампон между дужками миндалин и
язычком (нельзя касаться тампоном губ, щек, языка) и собирают
материал с задней поверхности глотки, миндалин и участков
воспаления или изъязвления слизистой. Тампон с материалом помещают
в стерильную пробирку или в пробирку с транспортной или питательной
средой.
Кровь
для
исследований берут с соблюдением правил асептики и мер
индивидуальной защиты. Кровь забирают из локтевой вены в количестве
10-20 мл одноразовым шприцем и переносят в пробирку для посева на
питательные среды и заражения биопробных животных, в пробирку с
антикоагулянтом (4%-й раствор натрия цитрата в отношении 1:10 к
объему крови или 6%-й раствор ЭДТА в отношении 1:20 к объему крови)
для ПЦР-анализа, в пробирку для получения сыворотки для
иммуносерологических реакций.
Для постановки
кровяно-капельной реакции агглютинации и реакции лейкоцитолиза
кровь берут из пальца.
Отделяемое конъюнктивы
глаза
следует забирать до 17 суток болезни с помощью
стерильного тампона, предварительно увлажненного 0,9%-м раствором
натрия хлорида. Пробы из каждого глаза собирают отдельными
тампонами двумя-тремя круговыми движениями по слизистой оболочке
глаза. Тампон с материалом помещают в стерильную пробирку или
транспортную среду. При наличии обильного гнойного отделяемого
стерильным сухим ватным тампоном берут гной с внутренней
поверхности нижнего века движением к внутреннему углу глазной щели.
Необходимо следить, чтобы ресницы не касались тампона (придерживать
веко рукой). Доставка материала в лабораторию в течение 1 ч, если
используются специальные транспортные среды - в течение суток.
Емкости с пробами
маркируют, обрабатывают снаружи дезинфицирующим раствором,
упаковывают в полиэтиленовый пакет с застежкой-молнией и помещают в
контейнер для транспортирования биологического материала на
исследование. Контейнер с упакованным материалом опечатывают и
отправляют в лабораторию с нарочным на специально выделенном
транспорте. Поверхность стола после упаковки проб обрабатывают
дезинфицирующим раствором.
На доставляемые в
лабораторию пробы заполняют направление (прилож.1), в котором
указывают: адрес учреждения, в которое направляется проба (пробы);
фамилию, имя, отчество больного (умершего); пол, возраст, место
жительства, дату заболевания, дату обращения за медицинской
помощью, дату госпитализации, предварительный диагноз; особенности
эпидемиологического анамнеза; проводилась ли больному до взятия
материала антибактериальная терапия (когда, какие использовались
препараты, в какой дозе); вид материала, взятого для
бактериологического исследования; цель исследования; дату и час
забора материала; адрес, по которому следует сообщить результаты
бактериологического исследования; наименование учреждения,
должность, фамилию и инициалы лица, направляющего пробу (пробы),
подпись; время доставки пробы; должность, фамилию и инициалы
принявшего пробы.
Материал транспортируют в
лабораторию в сумке-холодильнике. В случае отсутствия условий для
хранения материала на холоде время от момента взятия материала до
начала исследования не должно превышать 5-6 ч.
Постановку и учет
иммуносерологических реакций проводят в бактериологической
лаборатории ЛПУ в соответствии с инструкциями по применению
диагностических препаратов. В динамике заболевания исследуют парные
сыворотки с интервалом 7-10 дней. Диагностически достоверным
является 4-кратное и более увеличение титра антител.
Гиперчувствительность у
больных и вакцинированных лиц определяют in vitro
Постановку и учет
результатов аллергической пробы с тулярином (аллерген туляремийный
жидкий, суспензия для накожного скарификационного нанесения) у лиц,
зараженных или подозрительных на зараженность туляремией,
осуществляет врач-инфекционист ЛПУ в соответствии с инструкцией по
применению препарата.
Следует помнить, что
аллергическая проба остается положительной у лиц, переболевших
туляремией.
5.1.4. Оформление результатов исследования
Регистрацию результатов
серологического и аллергического исследования сывороток на
туляремию в бактериологических лабораториях ЛПУ осуществляют в
соответствии с учетными формами, установленными в учреждении.
Выдача ответов для историй болезней - по унифицированным
формам.
5.1.5. Порядок взаимодействия лечебно-профилактических учреждений с организациями Роспотребнадзора
5.2. Порядок организации и проведения лабораторной диагностики туляремии для филиалов ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии" в муниципальном образовании (городе и административных районах субъекта, объединенных по территориальному признаку) в субъекте Российской Федерации
5.2.1. Требования к лабораториям филиалов ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии" в муниципальном образовании в субъекте Российской Федерации, осуществляющим исследования на туляремию
Наличие
разрешительных и регламентирующих работу документов
ФБУЗ "Центр гигиены и
эпидемиологии" в субъекте Российской Федерации, на базе филиалов
которого функционируют бактериологические лаборатории, должен иметь
лицензию на осуществление деятельности, связанной с использованием
возбудителей II-IV (или III-IV) групп патогенности (опасности).
Лаборатории филиалов ФБУЗ
"Центр гигиены и эпидемиологии" в муниципальном образовании в
субъекте Российской Федерации, выполняющие исследования на
туляремию, должны иметь санитарно-эпидемиологическое заключение о
возможности проведения работ с микроорганизмами III-IV групп
патогенности (опасности) в соответствии с действующими СП о порядке
выдачи санитарно-эпидемиологического заключения о возможности
проведения работ с возбудителями инфекционных болезней человека
I-IV групп патогенности (опасности),
генно-инженерно-модифицированными микроорганизмами, ядами
биологического происхождения и гельминтами.
Лаборатории филиалов ФБУЗ
"Центр гигиены и эпидемиологии" в муниципальном образовании в
субъекте Российской Федерации должны быть аккредитованы на
техническую компетентность в установленном порядке в соответствии с
действующей законодательной базой Российской Федерации.
Учет, хранение, передача
и транспортирование проб клинического материала должны
осуществляться в соответствии с действующими СП о порядке учета,
хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I-IV групп
патогенности.
Утилизация отходов должна
осуществляться в соответствии с действующими
санитарно-эпидемиологическими требованиями к обращению с
медицинскими отходами.
Требования к
специалистам и персоналу, участвующим в выполнении исследований на
туляремию
Исследования на туляремию
могут выполнять специалисты не моложе 18 лет с высшим и средним
медицинским, биологическим образованием, окончившие курсы
подготовки по специальности "Бактериология" с освоением методов
безопасной работы с возбудителями инфекционных болезней III-IV
групп патогенности (опасности), имеющие допуск к работе с ПБА
III-IV групп на основании приказа руководителя учреждения.
Специалисты, проводящие диагностические исследования на туляремию,
должны иметь необходимые профессиональные навыки в соответствии с
номенклатурой проводимых исследований (прилож.8).
Специалисты,
осуществляющие деятельность, связанную с использованием
возбудителей инфекционных болезней, должны иметь сертификат
специалиста и повышать квалификацию не реже одного раза в пять
лет.
Требования к
обеспечению безопасности работы персонала
Каждая лаборатория,
выполняющая исследования на туляремию, должна иметь пакет
документов, определяющих режим безопасной работы сотрудников с
учетом характера работ, особенностей технологии, свойств
микроорганизмов. Документы должны быть согласованы с комиссией по
контролю соблюдения требований биологической безопасности,
специалистами по охране труда, противопожарным мероприятиям и
утверждены руководителем учреждения. Результаты проверок знаний
правил техники безопасности персонала при проведении работ
фиксируются в специальном журнале.
Все сотрудники должны
выполнять требования по обеспечению безопасности работы с
материалом, подозрительным или зараженным возбудителями
инфекционных болезней III-IV групп патогенности (опасности), в
соответствии с действующими нормативными документами.
Сотрудники учреждения,
привлекаемые к эпизоотологическому обследованию энзоотичной
территории, должны быть вакцинированы против туляремии с
последующим контролем уровня иммунитета и регистрацией результатов
в специальном журнале.
Порядок организации
внутреннего контроля качества лабораторных исследований
Контроль качества
диагностических исследований на туляремию в лабораториях
включает:
контроль качества диагностических
препаратов и тест-систем, дистиллированной воды, химических
реактивов и дезинфицирующих средств;
своевременную поверку средств измерений,
аттестацию испытательного оборудования;
контроль качества стерилизации лабораторной
посуды;
контроль работы паровых и суховоздушных
стерилизаторов;
контроль работы бактерицидных ламп;
контроль температурного режима
холодильников;
контроль температурного режима
термостатов;
проверку состояния воздуха производственных
помещений и боксов, температурного режима, влажности;
проверку санитарного состояния помещений,
включая условия уборки, дезинфекции, контроль смывов с поверхностей
и оборудования.
Результаты контроля
фиксируют в специальных журналах.
Правила ведения
документации
Ведение лабораторной
документации, включая регистрационные и рабочие журналы,
осуществляют в соответствии с требованиями действующих
нормативно-методических документов.
Требования к
материальным ресурсам, необходимым для выполнения диагностических
исследований на туляремию
Для проведения
диагностических исследований на туляремию в бактериологических
лабораториях филиалов ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии" должны
быть в наличии:
диагностические препараты, тест-системы,
зарегистрированные в установленном порядке (прилож.3);
химические реактивы (прилож.4);
приборы, оборудование, расходные материалы
(прилож.5, 6).
Рекомендуется для забора
материала иметь комплект медицинский (укладку универсальную для
забора материала от людей и из объектов окружающей среды для
исследования на особо опасные инфекционные болезни).
Персонал должен быть
обеспечен спецодеждой и средствами индивидуальной защиты.
5.2.2. Номенклатура и объем исследований
Лаборатории филиалов ФБУЗ
"Центр гигиены и эпидемиологии" в муниципальных образованиях в
субъекте Российской Федерации при осуществлении эпидемиологического
надзора проводят контроль состояния противотуляремийного иммунитета
у вакцинированных людей.
Исследования осуществляют
в следующем объеме:
1) выявление антител;
2) постановка реакции
лизиса лейкоцитов.
Если лаборатория ЛПУ не
выполняет серологические исследования на туляремию, сыворотку
больных или с подозрением на это заболевание исследуют в филиале
ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии" в субъекте Российской
Федерации (по договоренности).
5.2.3. Порядок лабораторной диагностики туляремии в лабораториях филиалов ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии" в муниципальном образовании в субъекте Российской Федерации
Состояние иммунитета у
вакцинированных проверяют через 5 лет после вакцинации и в
последующем - 1 раз в 2 года.
Контроль состояния
противотуляремийного иммунитета осуществляют с помощью
аллергологического (реакция лейкоцитолиза) или одного из
серологических методов исследования (РА, реакция объемной
агломерации, РНГА, ИФА). При этом предпочтительнее использовать
серологические методы исследования. Материалом для исследования
являются кровь и сыворотка крови вакцинированного. При
необходимости можно использовать кровяно-капельную реакцию, которая
позволяет выдать ответ в течение 5 мин и может быть поставлена с
сухой каплей крови.
От больных или лиц с
подозрением на туляремию в динамике заболевания исследуют парные
сыворотки с интервалом 7-10 дней. Диагностически достоверным
является 4-кратное и более увеличение титра антител.
Гиперчувствительность у
вакцинированных и больных лиц определяют in vitro
в реакции
лейкоцитолиза в соответствии с действующими методическими
указаниями по эпидемиологическому надзору за туляремией.
5.2.4. Оформление результатов исследования
Регистрацию результатов
исследований в лабораториях филиалов ФБУЗ "Центр гигиены и
эпидемиологии" в муниципальном образовании в субъекте Российской
Федерации осуществляют в соответствии с учетными формами,
установленными в учреждении. Выдача ответов - по унифицированным
формам.
5.2.5. Порядок взаимодействия филиалов ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии" в муниципальном образовании в субъекте Российской Федерации с другими организациями Роспотребнадзора
Информация о результатах
лабораторной диагностики туляремии в лаборатории филиала ФБУЗ Центр
гигиены и эпидемиологии в субъекте Российской Федерации передаётся
в соответствии с действующими нормативными документами.
5.3. Порядок организации и проведения лабораторной диагностики туляремии для ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии" в субъекте Российской Федерации
5.3.1. Порядок организации и проведения лабораторной диагностики туляремии для ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии" в субъекте Российской Федерации, в структуре которых отсутствуют отделы и лаборатории особо опасных инфекций
Порядок организации и
проведения лабораторной диагностики туляремии для лабораторий ФБУЗ
"Центр гигиены и эпидемиологии" в субъектах Российской Федерации, в
структуре которых отсутствуют отделы или лаборатории особо опасных
инфекций, соответствует порядку организации и проведения
лабораторной диагностики туляремии для лабораторий филиалов ФБУЗ
"Центр гигиены и эпидемиологии" в субъекте Российской Федерации
(раздел 5.2).
5.3.2. Порядок организации и проведения лабораторной диагностики туляремии для лабораторий особо опасных инфекций ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии" в субъекте Российской Федерации
5.3.2.1. Требования к
лабораториям особо опасных инфекций ФБУЗ "Центр гигиены и
эпидемиологии" в субъекте Российской Федерации, осуществляющим
исследования на туляремию.
Наличие
разрешительных и регламентирующих работу документов
ФБУЗ "Центр гигиены и
эпидемиологии" в субъекте Российской Федерации, на базе которых
функционируют лаборатории особо опасных инфекций, выполняющие
исследования на туляремию, должны иметь лицензию на осуществление
деятельности, связанной с использованием возбудителей II-IV групп
патогенности (опасности).
Лаборатории ООИ ФБУЗ
"Центр гигиены и эпидемиологии" в субъекте Российской Федерации,
осуществляющие исследования на туляремию, должны иметь
санитарно-эпидемиологическое заключение о возможности проведения
работ с микроорганизмами II-IV групп патогенности (опасности) в
соответствии с действующими СП о порядке выдачи
санитарно-эпидемиологического заключения о возможности проведения
работ с возбудителями инфекционных болезней человека I-IV групп
патогенности (опасности), генно-инженерно-модифицированными
микроорганизмами, ядами биологического происхождения и
гельминтами.
Лаборатории ФБУЗ "Центр
гигиены и эпидемиологии" в субъекте Российской Федерации должны
быть аккредитованы на техническую компетентность в установленном
порядке в соответствии с действующей законодательной базой
Российской Федерации.
Учет, хранение, передача
и транспортирование выделенных подозрительных культур возбудителя
туляремии и/или проб клинического материала должны осуществляться в
соответствии с действующими СП о порядке учета, хранения, передачи
и транспортирования микроорганизмов I-IV групп патогенности.
Утилизация отходов должна
осуществляться в соответствии с регламентированными
санитарно-эпидемиологическими требованиями к обращению с
медицинскими отходами.
Проведение исследований
на всех этапах: отбор проб, их хранение, доставка в лабораторию,
регистрация, порядок исследования, выдача результатов,
взаимодействие с организациями Роспотребнадзора должны
соответствовать требованиям действующих нормативных документов.
Требования к
специалистам и персоналу, участвующим в выполнении исследований на
туляремию
Исследования на туляремию
могут выполнять специалисты не моложе 18 лет с высшим и средним
медицинским, биологическим образованием, окончившие курсы
подготовки по специальности "Бактериология" с основами безопасной
работы с патогенными биологическими агентами (ПБА) I-II групп,
имеющие допуск к работе с ПБА II-IV групп на основании приказа
руководителя учреждения. Специалисты, проводящие исследования на
туляремию, должны иметь необходимые профессиональные навыки
(прилож.8).
Специалисты,
осуществляющие деятельность, связанную с использованием
возбудителей инфекционных болезней, должны иметь сертификаты и
повышать квалификацию не реже одного раза в пять лет.
Требования к
обеспечению безопасности работы персонала
Каждая лаборатория,
осуществляющая исследования на туляремию, должна иметь пакет
документов, определяющих режим безопасной работы сотрудников с
учетом характера работ, особенностей технологии, свойств
микроорганизмов. Документы должны быть согласованы с комиссией по
контролю соблюдения требований биологической безопасности,
специалистами по охране труда, противопожарным мероприятиям и
утверждены руководителем учреждения. Результаты проверок знаний
правил техники безопасности персонала при проведении работ
фиксируются в специальном журнале.
Специалисты,
осуществляющие эпизоотологическое обследование энзоотичной по
туляремии территории и его лабораторное обеспечение, должны быть
вакцинированы против туляремии с последующим контролем уровня
иммунитета и регистрацией результатов в специальном журнале.
Все сотрудники должны
выполнять требования по обеспечению безопасности работы с
материалом, подозрительным или зараженным возбудителями
инфекционных болезней I-II групп патогенности (опасности), в
соответствии с действующими нормативными документами.
Порядок организации
внутреннего контроля качества лабораторных исследований
Контроль качества
диагностических исследований на туляремию в лабораториях ООИ ФБУЗ
"Центр гигиены и эпидемиологии" включает:
контроль качества питательных сред,
диагностических препаратов и тест-систем, дисков с
антибактериальными препаратами, дистиллированной воды, химических
реактивов и дезинфицирующих средств;
своевременную поверку средств измерений,
аттестацию испытательного оборудования;
контроль качества стерилизации лабораторной
посуды;
контроль работы паровых и суховоздушных
стерилизаторов;
контроль работы бактерицидных ламп;
контроль температурного режима
холодильников;
контроль температурного режима
термостатов;
проверку состояния воздуха производственных
помещений и боксов, температурного режима, влажности;
проверку санитарного состояния помещений,
включая условия уборки, дезинфекции, контроль смывов с поверхностей
и оборудования.
Результаты контроля
фиксируют в специальных журналах.
Правила ведения
документации
Ведение лабораторной
документации, включая регистрационные и рабочие журналы,
осуществляют ежедневно в соответствии с требованиями действующих
методических документов.
Требования к
материальным ресурсам, необходимым для выполнения диагностических
исследований на туляремию
Для проведения
диагностических исследований на туляремию в лабораториях должны
быть в наличии:
питательные среды, зарегистрированные в
установленном порядке (прилож.2);
диагностические препараты, тест-системы,
антибактериальные препараты, зарегистрированные в установленном
порядке (прилож.3, 7);
химические реактивы (прилож.4);
приборы, оборудование, расходные материалы
(прилож.5, 6);
комплект медицинский (укладка универсальная
для забора материала от людей и из объектов окружающей среды для
исследования на особо опасные инфекционные болезни).
Питательные среды
подлежат обязательному контролю согласно действующим методическим
указаниям по контролю диагностических питательных сред по
биологическим показателям (для возбудителя туляремии).
5.3.2.2. Номенклатура и
объем исследований.
Лаборатории ООИ ФБУЗ
"Центр гигиены и эпидемиологии" в субъектах Российской Федерации,
проводят:
исследование материала от больных и умерших
с подозрением на туляремию;
исследование материала от лиц, подлежащих
обследованию на туляремию в соответствии с требованиями эпиднадзора
(по согласованию);
исследование проб, собранных в ходе
эпизоотологического обследования территории;
исследование проб из объектов окружающей
среды;
идентификацию выделенных культур
возбудителя туляремии по сокращенной схеме;
контроль качества и ингибирующих свойств
питательных сред.
Диагностические
исследования материала осуществляют в следующем объеме:
а) индикация возбудителя
в нативном материале методами экспресс- и ускоренной диагностики
(МФА, ПЦР, ИФА, РА, РНГА, РНАт, селективное концентрирование на МИС
с последующей постановкой ИФА);
б) постановка
биологической пробы;
в) посев на питательные
среды с целью выделения чистой культуры возбудителя;
г) выявление антител к
возбудителю туляремии;
д) идентификация
выделенной культуры по сокращенной схеме.
5.3.2.3. Порядок
диагностических исследований на туляремию в лабораториях особо
опасных инфекций ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии" в субъекте
Российской Федерации.
Порядок
исследования клинического материала
Отбор материала
осуществляют в соответствии с п.5.1.
Для выявления возбудителя
туляремии используют диагностические препараты и сложные агаровые
или желточные среды с добавлением цистеина, тканевых экстрактов,
дефибринированной крови, глюкозы, зарегистрированные в
установленном порядке. Каждая серия агара должна быть проверена на
чувствительность к росту туляремийного микроба согласно действующим
нормативно-методическим документам. Для подавления роста
посторонней микрофлоры используют пенициллин (100 ед./мл),
ампициллин (100 ед./мл), полимиксин В (50-100 мкг/мл), кефзол (или
цефалексин), амфотерицин В (или амфоглюкамин), ристомицина сульфат
и некоторые другие антибактериальные препараты.
Объекты с посевами
инкубируют при температуре 37 °С. Просмотр посевов осуществляют
через 24-48 ч (далее - ежедневно в течение 10 суток от момента
посева).
Подготовку проб для ПЦР
осуществляют в соответствии с требованиями методических указаний по
организации работы лабораторий, использующих методы амплификации
нуклеиновых кислот при работе с материалом, содержащим
микроорганизмы I-IV групп патогенности.
Исследование
материала от больного человека (трупа)
I этап:
приготовление мазков, окраска фиксированных
мазков по Грамму, Романовскому-Гимзе, иммуноглобулинами
флюоресцирующими туляремийными;
постановка ПЦР;
постановка иммуносерологических реакций для
обнаружения антигенов и антител к возбудителю туляремии (РА, МФА,
РНГА, РНАт, ИФА и др.);
постановка реакции лейкоцитолиза (кровь
больного);
заражение биопробных животных (морские
свинки внутрибрюшинно; белые мыши внутрибрюшинно или подкожно
(кровь, пунктат бубона), подкожно (мокрота, мазок из зева,
вскрывшийся бубон, отделяемое язвы, конъюнктивы);
посев на плотные питательные среды (кровь,
пунктат бубона);
посев на плотные питательные среды с
ингибиторами посторонней флоры (мокрота, мазок из зева, субстрат из
вскрывшегося бубона, отделяемое язвы, конъюнктивы).
II этап
(2-6 ч от
начала исследования):
учет результатов МФА, ИФА, ПЦР;
учет результатов РА, РПГА и РНАт через
18-24 ч;
выдача предварительного положительного
ответа
на основании наличия в мазках мелких кокковидных палочек
грамотрицательных или сиреневого цвета при окраске по
Романовскому-Гимзе, их специфического свечения при окраске мазка
иммуноглобулинами флуоресцирующими туляремийными, положительного
результата ПЦР, положительных иммуносерологических реакций при
отрицательных контролях.
III этап
(48-72 ч
от начала исследования):
просмотр посевов нативного материала на
агаровых пластинках;
бактериоскопия мазков из подозрительных
колоний (окраска по Граму);
постановка ИХ-теста для
экспресс-идентификации туляремийного микроба с материалом из
подозрительных колоний;
отсев подозрительных колоний туляремийного
микроба на питательный агар для выделения чистой культуры;
выдача подтверждения предварительного
положительного ответа
на основании наличия характерного роста
на плотных питательных средах, наличия в мазках из колоний мелких
грамотрицательных кокковидных палочек, положительного ИХ-теста для
экспресс-идентификации туляремийного микроба.
IV этап
(3-5-е
сутки от начала исследования):
после накопления чистой культуры постановка
тестов для ее идентификации. Идентификацию выделенной культуры
проводят по следующим тестам:
морфология клетки, характер окраски по
Граму и иммуноглобулинами флуоресцирующими туляремийными;
характер роста на питательных средах
FT-arape или на свернутой желточной среде Мак-Коя;
отсутствие роста на простых питательных
средах (мясопептонном агаре и/или бульоне);
агглютинация культур специфической
туляремийной сывороткой или постановка РЛА с выделенной
культурой;
экспресс-идентификация туляремийного
микроба с использованием ИХ-теста;
выявление видоспецифичных ДНК-мишеней
методом ПЦР;
вскрытие павших биопробных животных, посев
органов и крови на плотные питательные среды, приготовление и
просмотр мазков-отпечатков органов, постановка ПЦР с суспензиями
органов.
V этап
(5-15-е
сутки от начала исследования):
учет результатов идентификации культур;
просмотр посевов материала от павших
биопробных животных;
вскрытие и исследование забитых биопробных
животных;
выдача окончательного положительного
ответа
проводится на основании выделения чистой культуры
туляремийного микроба из посевов нативного материала, его
идентификации по морфологическим, культуральным свойствам,
положительных результатов иммуносерологических реакций, наличию ДНК
возбудителя, а также на основании выделения идентичных культур от
павших или забитых лабораторных животных.
Вторая группа
.
Высоковосприимчивые, но малочувствительные млекопитающие
(заражаются при попадании в организм единичных микробных клеток
возбудителя туляремии, болеют тяжело, но быстро освобождаются от
микроба, приобретая устойчивый иммунитет). К этой группе относятся
полевая мышь, все виды крыс и сусликов, белки, бурундуки, бобры,
ежи, выхухоль, кутора, белозубка и некоторые другие виды
млекопитающих.
Третья группа
.
Маловосприимчивые и практически нечувствительные млекопитающие. К
ним относится большинство хищных млекопитающих и
сельскохозяйственных животных.
Схема исследования
полевого материала
Лабораторное исследование
полевого материала начинают сразу же после его поступления.
Допускается его кратковременное хранение (не более 20 ч) при
температуре от 4 до 6 °С. При вскрытии зверьков на месте сбора
возможно хранение органов и доставка их в лабораторию в
консерванте. Консервантами могут служить вазелино-парафиновая смесь
(1 часть парафина и 10 частей вазелинового масла смешивают и
стерилизуют 45 мин прогреванием на кипящей водяной бане), 5%-й
раствор поваренной соли, кроме того, используют глубокое
замораживание в жидком азоте и др. В консервантах и при низкой
температуре органы животных можно сохранять в течение одного
месяца.
Исследование проводят
биологическим, бактериоскопическими (световая и люминесцентная
микроскопия), бактериологическими (посев на питательные среды,
выделение чистых культур и их идентификация),
молекулярно-генетическим (ПЦР-анализ) и иммуносерологическими (РА,
РЛА, РНГА, РНАт, РНАг, ИФА) методами. Схема исследования материала
зависит от группы чувствительности животных и от того, в каком виде
доставлен материал.
Мелких
млекопитающих
, добытых в природе орудиями лова или живыми,
исследуют групповым методом, объединяя в одну пробу органы
нескольких зверьков (5-10) одного вида и пойманных в одном
месте.
Для исследования отбирают
кусочки селезенки, печени, лимфатические узлы, кровь или "смывы" из
грудной полости. Материал исследуют биологическим,
молекулярно-генетическим и иммуносерологическими методами.
Суспензию органов
используют для заражения биопробных животных и выявления антигенов
и ДНК возбудителя туляремии. Сыворотку крови или "смывы" из грудной
полости исследуют на наличие антител к возбудителю туляремии.
Трупы зверьков
,
погибших в природе, павших в лаборатории, или животных, у которых
при вскрытии обнаружены патолого-анатомические изменения,
характерные для туляремии, подвергают индивидуальному исследованию.
Кусочки селезенки, печени, почек, лимфатические узлы, костный мозг
исследуют биологическим, бактериологическим,
молекулярно-генетическим и иммуносерологическими методами.
В
условиях установленной эпизоотии при исследовании животных первой
группы можно ограничиться посевом органов на питательные среды и
бактериоскопией мазков из органов, сохраняя часть их на холоде до
получения результатов исследований. В сомнительных случаях
прибегают к биологическому методу. Животных второй и третьей групп
биологическим методом исследуют обязательно.
Вероятность обнаружения
возбудителя туляремии в органах животных первой группы при
микроскопическом исследовании (лучше использовать люминесцентную
микроскопию) значительно выше, чем при бактериоскопии мазков из
органов трупов животных второй группы.
Домашние животные
(крупный рогатый скот, свиньи, овцы, северные олени) относятся к
видам, малочувствительным к туляремии (третья группа). При их
исследовании используют главным образом иммуносерологические методы
(РА, РНГА, ИФА), реже - внутрикожную пробу с тулярином.
Бактериологический и биологический методы применяют только при
обследовании павших, забитых или больных животных. Исследуют в
первую очередь лимфатические узлы и селезенку. При серологическом
исследовании следует учитывать возможность обнаружения перекрестных
реакций с бруцеллами и микробной флорой кишечника животных.
Целесообразно исследовать сыворотки домашних животных, по крайней
мере, в двух серологических реакциях. Положительные реакции в РНГА
следует контролировать в РТНГА.
Погадки хищных птиц и
помет хищных млекопитающих
рекомендуется исследовать
индивидуально. Гибель туляремийного микроба в погадках и помете
происходит быстро (в первые сутки; при отрицательных температурах,
возможно, медленнее), в связи с чем биологическое и
бактериологические исследования этого материала нецелесообразны.
Пробы погадок и помета используют для поиска антигена возбудителя
туляремии иммуносерологическими методами и ДНК методом ПЦР.
Кровососущих насекомых
и других беспозвоночных животных
исследуют групповым методом, в
одну пробу объединяют насекомых или беспозвоночных животных одного
вида (рода) и добытых из одного места.
Взрослых иксодовых клещей
объединяют до 50 особей.
Личинок объединяют по
100-200 экземпляров, нимф - по 50-100 в зависимости от степени их
упитанности. Промывание личинок и нимф иксодовых клещей в спирте не
проводят, т.к. это может повредить анализу.
Блох, гамазовых клещей,
вшей сортируют по видам (родам), а также по видам зверьков, с
которых они были собраны, помещают в стерильные пробирки и далее
подвергают обработке по той же методике, что личинок и нимф
иксодовых клещей.
Кровососущих двукрылых
насекомых усыпляют парами эфира для ограничения подвижности. У
слепней предварительно отстригают конечности и крылья, комаров и
мошек исследуют целиком. В один анализ включают до 25-50 слепней
или до 100 комаров, или до 250 мошек.
Гидробионтов -
ручейников, бокоплавов, дафний, циклопов и других
перед
исследованием промывают в нескольких порциях воды и 1-2 порциях
стерильной дистиллированной воды. У животных, имеющих чехлики или
раковинки, последние по возможности удаляют. Животных объединяют в
группы по 5-10-50 экземпляров в зависимости от размеров особей
отдельных видов.
Обнаружение туляремийного
микроба или его ДНК в организме беспозвоночных наиболее эффективно
при использовании биологического метода и ПЦР. Также возможно
обнаружение специфического антигена туляремийного ЛПС с помощью
ИХ-теста.
Пробы воды
(100-200 мл) берут из различных водоемов: речек, ручьев, прудов,
озер, болот, колодцев и т.п. Наиболее эффективно исследование воды
в поименно-болотных очагах туляремии в зимнее время. Пробы берутся
в затененном месте, на глубине 10-20 см от поверхности стоячей или
слабопроточной воды. Из каждой точки следует брать по 2 пробы.
Отбирают пробы в местах обитания зверьков (возле кормовых столиков,
нор, хаток бобров или ондатр). Для концентрирования возбудителя
используют фильтрование, центрифугирование, магнитные сорбенты и
другие приемы. Для исследования используют биологический метод
(белой мыши вводят подкожно до 1 мл, а морской свинке - до 5 мл
воды), молекулярно-генетический и иммуносерологические методы,
направленные на выявление ДНК и антигенов возбудителя
туляремии.
Произошла ошибка
Платеж не был завершен из-за технической ошибки, денежные средства с вашего счета
списаны не были. Попробуйте подождать несколько минут и повторить платеж еще раз.
Глава 13. ПРАВИЛА ВЗЯТИЯ ПАТОЛОГИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА И ПЕРЕСЫЛКИ ЕГО ДЛЯ ЛАБОРАТОРНОГО ИССЛЕДОВАНИЯ
(Извлечение из Правил Главного управления ветеринарии Министерства сельского хозяйства СССР, утвержденных 24 июня 1971г.)
При необходимости определить или подтвердить причину заболевания или гибели животных (включая птиц, зверей, пчел, рыб), при подозрении на инфекционную или инвазионную болезнь или на отравление ветеринарный врач (фельдшер) обязан взять соответствующий патологический материал и направить его в ветеринарную лабораторию для исследования.
Во всех случаях взятия и пересылки материала специалист обязан руководствоваться изложенными ниже правилами, а также соответствующими инструкциями по борьбе с болезнями животных.
Взятие и пересылка патологического материала для бактериологического и вирусологического исследования. Патологический материал берут стерильными инструментами в стерильную посуду. Поверхность органа (ткани), от которого будут брать патологический материал, на месте разреза обжигают над пламенем или прижигают нагретой металлической пластинкой.
Патологический материал берут как можно раньше после смерти животного, особенно в теплое время года. При начавшемся разложении материал для исследования негоден.
В лабораторию материал отправляют в неконсервированном виде. Если доставить в лабораторию в течение ближайших 24-30 ч материал невозможно, то его консервируют.
Для бактериологического исследования патологический материал (органы или их части) консервируют в 30%-ном водном растворе химически чистого глицерина. Воду предварительно стерилизуют кипячением или автоклавированием в течение 30 мин. В качестве консерванта можно применять также стерильное вазелиновое масло. Материал заливают консервирующей жидкостью в количестве, в 4-5 раз превышающем его объем.
Материал, предназначенный для вирусологического исследования, консервируют в 30-50%-ном растворе химически чистого глицерина на физиологическом растворе поваренной соли. Физиологический раствор предварительно стерилизуют в автоклаве при 120 °С в течение 30 мин.
Небольшие трупы животных (поросята, ягнята, телята), а также трупы мелких животных посылают целыми в непроницаемой таре.
Трубчатые кости направляют целыми с неповрежденными концами. Предварительно их тщательно очищают от мышц и сухожилий и завертывают в марлю или полотно, смоченные дезинфицирующей жидкостью (5%-ный раствор карболовой кислоты). Кости можно также посыпать натрия хлоридом (поваренной солью) и завернуть в полотно или марлю.
Кишечник перед посылкой для бактериологического и вирусологического исследований освобождают от содержимого, а концы его перевязывают. На исследование посылают части кишечника с наиболее характерными патологическими изменениями. Помещают в банки с 30-40%-ным водным раствором глицерина или насыщенным водным раствором натрия хлорида. Объем консервирующей жидкости должен в 5-7 раз повышать объем взятого материала.
Кал для исследования отправляют в стерильных стаканах, пробирках или банках, которые закрывают пергаментной бумагой. От трупов животных кал можно послать в отрезке невскрытого кишечника, завязанного с обоих концов. В лабораторию кал должен быть доставлен не позднее 24 ч после взятия.
При посылке для исследования участков кожи берут наиболее пораженные части ее размером 10 х 10 см и кладут в стерильную, герметически закрывающуюся посуду.
Кровь, гной, слизь, мочу, желчь и другой жидкий патологический материал для бактериологического и вирусологического исследований посылают в запаянных пастеровских пипетках, стерильных пробирках или во флаконах, плотно закрытых стерильными резиновыми пробками.
Предметные стекла кипятят в течение 10-15 мин в 1-2%-ном водном растворе соды, затем тщательно промывают чистой водой, насухо вытирают и помещают в раствор спирта и эфира, взятых в равных частях, где и хранят до употребления.
Кровь берут из вены ушной раковины или края верхушки уха, у птиц - с поверхности гребня или из подкрыльцовой вены. Шерсть на месте взятия крови выстригают, кожу протирают ватными тампонами, смоченными сначала спиртом и затем эфиром. Инструменты (иглы, скальпель) должны быть стерильными.
Первую каплю крови удаляют стерильной ватой (исключение делается при исследовании крови на пироплазмидозы, когда для мазка берут первую каплю крови), а следующую свободно выступившую каплю берут на предварительно подготовленное предметное стекло быстрым и легким прикосновением к капле поверхностью стекла. Затем стекло быстро поворачивают вверх каплей и удерживают между пальцами левой руки в горизонтальном положении. К левому краю капли прикасаются под углом 45° шлифованным краем другого предметного (или покровного) стекла. Как только капля равномерно распределится по ребру этого стекла, его быстро проводят по поверхности предметного стекла слева направо, не доводя до края на 0,5-1 см. Ширина мазков должна быть уже предметного стекла. Для каждого нового мазка берут свежую каплю крови.
Готовые мазки крови высушивают только на воздухе. В холодное время года мазки делают в теплом помещении или на стеклах, подогретых на крышке теплого стерилизатора.
Метод фиксации мазков зависит от цели исследования.
Правильно приготовленные мазки крови должны быть тонкими, равномерными и достаточной длины. На высушенных мазках и отпечатках острым предметом делают надпись с указанием номера или клички животного и даты приготовления мазка.
Мазки из тканей, гноя, органов и различных выделений готовят путем размазывания материала на предметном стекле стерильной палочкой или ребром другого предметного стекла до тонкого слоя. Частицы органов плотной консистенции, твердые узелки, а также вязкий материал заключают между двумя предметными стеклами и растирают. Затем стекла разъединяют, растаскивая их в противоположные стороны в горизонтальном направлении. Получаются два довольно тонких мазка. Иногда делают препараты-отпечатки. Для этого вырезанный острым скальпелем кусочек органа захватывают пинцетом и свободной поверхностью кусочка делают на стекле несколько тонких отпечатков.
Взятие материала для патологогистологического исследования. Материал берут от свежих трупов или убитых животных не позднее 12, а летом - 2-3 ч после смерти от тех органов или тканей, где обнаружены патологические изменения, а также из главнейших паренхиматозных органов. Из разных участков патологически измененных органов (тканей) вырезают небольшие тонкие (не более 1- 2 см толщиной) кусочки. Вместе с пораженными участками ткани захватывают и граничащую с ней нормальную ткань. При иссечении кусочка учитывают микроскопическое строение (структуру) того или иного органа (ткани). Так, кусочки из почки, надпочечника, лимфатического узла берут с таким расчетом, чтобы попадали оба слоя - корковый и мозговой; из головного мозга - серое и белое вещество; из селезенки - белую и красную пульпу; из легкого - части органа с бронхами и плеврой. Из сердца берут несколько кусочков: из мышцы правого и левого желудочков, правого и левого предсердий, папиллярных мышц и области клапанов. Из всех органов при иссечении захватывают и их капсулу. Из разных отделов желудочно-кишечного тракта вырезают небольшие кусочки размером 2 х 3 см и перед погружением в фиксирующую жидкость их растягивают на картон и прошивают белыми нитками.
Взятый материал помещают в фиксирующую жидкость (10%-ный водный раствор нейтрального формалина), объем которой в 4-5 раз превышает объем взятого материала. В холодное время года во избежание промерзания при пересылке материал, профилированный в формалине, перекладывают в 30-50%-ный раствор глицерина (приготовленный на 10%-ном растворе формалина), в 70%-ный спирт или в насыщенный раствор натрия хлорида.
Если формалина нет, то в качестве фиксирующей жидкости используют 96%-ный этиловый спирт или ацетон. При применении спирта толщина кусочков не должна превышать 0,5 см. Для гистохимических исследований патологический материал можно фиксировать также в жидкости Карнуа (спирт абсолютный - 60 мл, хлороформ - 30 мл и ледяная уксусная кислота - 10 мл) или в жидкости Буэна (концентрированная пикриновая кислота - 15 мл, формалин - 5 мл, ледяная уксусная кислота - 1 мл). Фиксирующую жидкость меняют каждые сутки до тех пор, пока она не станет прозрачной. Оптимальная температура фиксации 37 °С.
Патологический материал фиксируют в стеклянной или в крайнем случае в глиняной посуде.
На банку с кусочками органов и тканей наклеивают этикетку, на которой указывают номер или кличку животного и кому принадлежит, а внутрь ее опускают кусочек плотной бумаги или картона с написанным на нем простым (не химическим) карандашом номером животного.
Помещать в посуду несколько объектов исследования от разных животных можно только при том условии, если каждый из них завязывают в марлю вместе с отдельной этикеткой.
Упаковка и пересылка патологического материала. Трупы мелких животных, части трупов крупных животных и отдельные органы в свежем (нефиксированном) виде отправляют для исследования в лабораторию только с нарочным. Посылаемый материал, особенно от животных, подозрительных по заболеванию инфекционной болезнью, тщательно упаковывают в плотный деревянный или металлический ящик, чтобы предупредить возможность рассеивания возбудителя инфекции в пути. Перед упаковкой материал завертывают в холст или мешковину, смоченную дезинфицирующим раствором (фенольным креолином, лизолом, известковым молоком), обертывают целлофаном или полиэтиленовой пленкой и кладут в ящик со стружками, мякиной или опилками.
Части органов, жидкости, отправляемые в лабораторию почтой в фиксированном или консервированном виде, помещают в герметически закупоренную стеклянную посуду с притертой стеклянной, пластмассовой, резиновой или корковой пробкой. Пробку закрепляют проволокой или бечевкой и заливают менделеевской замазкой (сургучом, смолкой, парафином или воском), чтобы укупорка была непроницаемой для жидкости. Укупоренную посуду вкладывают в прочно сбитый ящик, плотно обкладывают ватой, паклей, стружками, опилками или другим упаковочным материалом.
При пересылке почтой или с нарочным патологического материала от животных, подозрительных по заболеванию инфекционной болезнью, или явно инфицированного материала упаковка должна гарантировать доставку материала в целости и исключить возможность рассеивания возбудителей инфекции. На лицевой стороне посылки вверху должны быть надписи: «Осторожно - стекло» и «Верх».
Стеклянную посуду, в которой заключен посылаемый материал с подозрением на наличие особо опасных болезней (сап, сибирская язва, эмфизематозный карбункул, бруцеллез, туляремия, перипневмония крупного рогатого скота, чума крупного рогатого скота, чума свиней, псевдочума птиц, ящур, бешенство), обязательно упаковывают в металлическую коробку, которую запаивают, пломбируют или опечатывают, а затем упаковывают еще в деревянный ящик.
Если такой материал отправляют с нарочным, его кладут в стеклянную посуду, герметически закупоривают и помещают в деревянный ящик.
Взятие и отправка патологического материала при подозрении на отравление. Подозрение на отравление могут вызвать следующие признаки:
а) характерный запах содержимого желудка (горькоминдальный, чесночно-хлороформенный и т. п. при исключении запаха примененных лекарств);
б) окраска содержимого желудка: желтая (от азотной и пикриновой кислот, солей хрома), зеленая, синяя (от солей меди) или иного цвета;
в) кровянистое содержимое желудка;
г) подозрительные включения в содержимом желудка - белые кристаллы сулемы и стрихнина, нерастворившиеся белые кристаллы мышьяка;
д) набухшие, увеличенные, дряблые, легко разрывающиеся серо-желтой окраски и т. п. слизистая оболочка желудка, почки, сердце;
е) поражения начальных отделов пищеварительного тракта (ротовой полости, пищевода, желудка);
ж) изменение цвета и консистенции крови.
При подозрении на отравление в лабораторию направляют материал от трупов павших животных для химического и гистологического исследований. Одновременно с целью определения источника отравления посылают все корма (по 1 кг корма каждого вида), которые скармливали животным. Обязательно посылают остатки кормов из кормушки.
Для химического исследования в лабораторию посылают в отдельных банках следующий материал:
а) часть пищевода и пораженную часть желудка с содержимым (в количестве 0,5 кг), а от крупного и мелкого рогатого скота и верблюдов - часть пищевода, сычуга и небольшое количество содержимого из разных мест сычуга, рубца.
Желудок и его содержимое берут в следующем порядке.
При вскрытии трупа после осмотра внутренних органов перевязывают лигатурами пищевод и двенадцатиперстную кишку вблизи стенки желудка (по две лигатуры) и перерезают между ними. Желудок извлекают и кладут в кюветы, а затем вскрывают. Содержимое желудка предварительно (не выбирая из желудка) перемешивают (нельзя использовать металлические предметы), после чего осторожно, чтобы не загрязнить, берут часть его;
б) отрезок тонкого кишечника (длиной до 40 см) в наиболее пораженной части вместе с содержимым (до 0,5 кг);
в) отрезок толстого кишечника ^длиной до 40 см) в наиболее пораженной части вместе с содержимым (до 0,5 кг);
г) часть печени (0,5-1 кг) с желчным пузырем (от крупных животных), печень целиком (от мелких животных);
е) мочу в количестве 0,5 л;
ж) скелетную мускулатуру в количестве 0,5 кг.
Кроме того, в зависимости от особенностей предполагаемого отравления дополнительно посылают:
а) при подозрении на отравление через кожу (путем инъекции) - часть кожи, клетчатки и мышцы из места предполагаемого введения яда;
б) при подозрении на отравление газами (сероуглеродом и т. д.) - наиболее полнокровную часть легкого (в количестве 0,5 кг), трахею, часть сердца, 200 мл крови, часть селезенки и головного мозга. От мелких животных (в т<9к числе и от птиц) берут органы целиком.
При вскрытии отрытого из земли трупа животного берут: сохранившиеся внутренние органы в количестве до 1 кг; скелетную мускулатуру в количестве 1 кг, землю под трупом 0,5 кг из двух-трех мест.
Для гистологического исследования посылают небольшие кусочки, размером 1 х 3 х 5 см, следующих органов: печени; почек (обязательно с наличием коркового и мозгового слоев); сердца; легкого; селезенки; языка; пищевода; желудка; тонкого и толстого кишечника; скелетной мускулатуры; лимфоузлов; головного мозга (половину мозга в стерильной банке).
Кусочки берут из пораженных участков органов и на границе с ними из непораженной части ткани и помещают в 10%-ный раствор формалина (из расчета на 1 часть патологического материала 10 частей раствора формалина).
При подозрении на отравление веществами, употребляемыми для борьбы с сельскохозяйственными вредителями, минеральными удобрениями, красками, посылают пробы их в количестве от 100 до 1000 г.
От больных животных при подозрении на отравление посылают: рвотные массы, желательно первые порции; мочу (все количество, которое удалось получить); кал в количестве 0,5 кг; содержимое желудка, полученное через пищеводный зонд; корма и вещества, которые могли явиться причиной отравления.
Если заподозрено, что отравление наступило вследствие поедания ядовитых растений, берут для ботанического анализа пробы растений. Для этого деревянную рамку с внутренним размером в 1 м2 накладывают на травостой луга или пастбища в местах выпаса скота. Все оказавшиеся внутри рамки растения срезают под корень. Если травостой однотипный, пробу с 1 га луга или пастбища берут в 3-5 местах, при разнотипном травостое количество проб увеличивают с целью большего охвата различных растений и посылают среднюю пробу.
Если пробу трав", взятых для исследования, можно доставить в лабораторию в течение нескольких часов, траву посылают в сыром виде. В противном случае пробы сушат и доставляют сухими. Пересылают пробы трав в коробках или плетеных корзинах.
Пробы берет ветеринарный специалист или зоотехник.
Материал, взятый для химического исследования, нельзя обмывать и держать вместе с металлическими предметами; его отправляют в чистом, неконсервированном виде. Материал животного происхождения консервируют только в том случае, если он будет доставлен в лабораторию не ранее чем через 3-4 дня после взятия. Для консервирования материала применяют спирт-ректификат в соотношении 1 часть спирта на 2 части материала. Одновременно посылают и пробу спирта (не менее 50 г), которым консервирован материал.
Применять два консервирующих вещества нельзя, так как они сами являются ядами (хлороформ) или разрушают некоторые яды (формалин).
Упаковывают материал в чистые широкогорлые стеклянные или глиняные банки, плотно закрывающиеся стеклянными притертыми пробками, а если таких нет, чистыми, не бывшими в употреблении корковыми пробками или чистой писчей или вощеной бумагой.
Поверх пробки банку обертывают чистой бумагой, обвязывают тонким шпагатом (или толстой крепкой ниткой), концы которого скрепляют сургучной печатью.
На каждую банку наклеивают этикетку, на которой чернилами записывают, какие органы и в каком количестве (по массе) помещены в банку, вид и кличку животного, даты падежа и вскрытия трупа животного, указывают, какое подозревается отравление и кому принадлежит животное.
Взятый материал отправляют в лабораторию немедленно с нарочным.
Порядок оформления и отправки сопроводительных документов к материалу, направляемому на исследование. На каждый отправляемый в лабораторию материал заполняют сопроводительный документ по форме, согласно приложению № 1 настоящих правил.
Сопроводительное письмо посылают в запечатанном конверте (одновременно с материалом) почтой или с нарочным.
В сопроводительном письме указывают: вид, пол и возраст животного, от которого взят материал для исследования, его номер или кличку, сколько банок с материалом, на какое исследование посылается материал, краткое описание клинических признаков и патологоанатомических изменений.
При посылке образцов корма указывают его название, дату взятия образца, с какого угодья. Если корм получен с завода или заготовительного пункта, указывают, с какого именно.
При необходимости к письму полагают дополнительные сведения, в частности, какая помощь оказана животному, какие лекарственные средства применялись, с какого времени скармливали корм животным и т. д. При отправке материал к из рыбохозяйственного водоема указывают клинико-эпизоотологические данные.
К сопроводительному письму на пробы (мазки) крови, направляемые в плановом порядке для серологического или гематологического исследования, прилагают опись проб в двух экземплярах.
Форма сопроводительного документа к патологическому материалу
Условия содержания и кормления лабораторных животных в ЭБК и вивариях должны обеспечить благоприятный биологический фон для их нормального развития и размножения. Основными условиями для этого являются содержание животных в вентилируемых, хорошо освещаемых и теплых помещениях, обеспечение их полноценными кормами и свежей водой в необходимом количестве, постоянное соблюдение требований зоогигиены.
Правилами содержания лабораторных животных предусмотрено размещение в каждой комнате только одного вида животных. Однако при вынужденном совместном содержании в одном помещении животных разного вида клетки с ними должны быть размещены на разных стеллажах.
Руководитель научно-исследовательского института, вуза или другого учреждения, в котором имеется ЭБК (виварий), утверждает распорядок дня по содержанию лабораторных животных, уходу за ними и их кормлению. В распорядке дня работы ЭБК (вивария) необходимо указать время, выделенное на уборку помещений, клеток, санитарную обработку их, время раздачи кормов и проведения экспериментальных работ.
Клетки, как основной микроклиматический объект для содержания лабораторных животных, должны обеспечивать им свободное передвижение и отвечать следующим санитарно-гигиеническим требованиям: 1) быть легкими и прочными; 2) изготавливаться из материала, который животные не могли бы погрызть; 3) быть устойчивыми к воздействию любых дезинфицирующих средств.
Клетки мелких лабораторных животных следует размещать на стеллажах в несколько ярусов. Первый ярус клеток должен находиться на расстоянии 30-70 см от пола. Полки с клетками необходимо покрывать изоляционным материалом (толем), предохраняющим клетки нижележащего яруса от попадания мочи. Для экономии времени на уборку клеток их строят с сетчатым дном, под которое протягивают оберточную бумагу из рулона. Фекалии и моча собираются на бумаге, и уборка клеток ограничивается тем, что ежедневно обрывают использованный кусок бумаги и сжигают его вместе с фекалиями. Кроме того, рекомендуется под дно каждой сетки вставлять специальные, вынимающиеся противни, в которых собираются кал и моча. Во время уборки противни вынимаются, освобождаются от выделений.
Кролики хорошо переносят морозы, и их можно содержать в клетках, размещенных во дворе. Собак, на которых проводятся хронические эксперименты, необходимо регулярно выводить на прогулку.
Лабораторных животных разных видов и возрастов необходимо содержать в отдельных помещениях. При необходимости животных разных видов размещают в одном помещении в разных сторонах.
На каждой клетке, боксе, вольере вешают таблички, где записывают данные о животном и вид эксперимента.
Лабораторных животных содержат в клетках со сплошным дном или с поддонами. Подстилку: опилки, стружки, торф, солому - предварительно обеззараживают автоклавированием или в сушильном шкафу при температуре 160-200 0 С в течение 10-15 мин. При необходимости подстилку сжигают.
Клетки чистят ежедневно. Отходы и мусор из клеток, подстилку складывают в специальный железный бочок с плотно закрывающейся металлической крышкой. После заполнения бачки передают в дезинфекционно-моечные отделения для обеззараживания. Чистку, мойку обеззараживание клеток проводят в специальных помещениях. Трупы для вскрытия хранят в холодильнике не менее 1 суток.
Падеж или вынужденный убой животных регистрируется в специальном журнале.
В конце рабочего дня во всех помещениях (секциях) вивария проводят влажную уборку пола с применением дезинфицирующих веществ (1%-ые растворы хлорамина, едкого натрия и др.).
Существует три системы содержания и разведения лабораторных животных: открытая, закрытая и изолированная.
Закрытая система - при ней лабораторных животных содержат в хорошо освещенных специальных помещениях, где поддерживается стабильный автоматически регулируемый микроклимат и создаются условия, препятствующие возникновению инфекционных болезней.
Изолированную систему - применяют для выращивания линейных и стерильных (безмикробных) лабораторных животных (гнотобионтов).
В питомниках и вивариях животных разного пола, как правило, содержат отдельно. Для случки подсаживают самок к самцам, а не наоборот, так как самцы при помещении в другое помещение (клетку) становятся боязливыми и их внимание отвлекается от самки. После случки самку снова возвращают на прежнее место. При необходимости случку повторяют.
За оплодотворенными самками необходимо тщательно ухаживать, хорошо кормить, особенно к концу плодоношения. За несколько дней до появления потомства для самок готовят отдельную клетку. Клетка должна быть предварительно очищена и продезинфицирована, иметь достаточное количество сухой и мягкой подстилки.
Кроликов, морских свинок, крыс, мышей и др. мелких грызунов размещают по видам и возрасту в клетках. Если кролики содержаться на улице, то лучше строить двухъярусные секции, по нескольку секций в ряд, под одной общей водонепроницаемой двух - или односкатной крышей. Пол в клетках оборудуют реечный или сетчатый. В одной стороне клетки устраивают и кормушку и поилку. Для кроликов приняты следующие размеры клеток в см: длина 120-130, ширина 60-70, высота передней стенки 80-90, высота задней стенки 50-55. При содержании кроликов в помещении клетки лучше изготавливать металлические с двойным полом, между которым вставляют поддон. Размеры такой клетки (см): длина 70, ширина 45, высота 50. Двери изготавливают из проволочной сетки с ячейками размером 2-3 см.
Взрослых кроликов размещают по одному в клетке, молодняк до 3 мес. возраста по 3-5 голов. Крольчат в выгулах или в клетках содержат по 10-15 голов из расчёта 0,2-0,4 м 2 на крольчонка. Их необходимо сортировать и содержать по полу. В клетках оборудуют сетчатый пол на высоте 60-70 см от пола помещения и на расстоянии не менее 45-50 см от стен.
Для морских свинок используют двухъярусные клетки с закрытым верхом, непроницаемым для влаги. Примерные размеры одной клетки (см): длина 65 см, ширина 55, высота 40.
Клетки для мышей и крыс обычно металлические, с выдвижными металлическими противнями. Остов клеток изготавливают из углового железа, бока - из металлической сетки. Размеры такой клетки в см: длина 50, ширина 40, высота 30. Клетки ставят в 2 или 3 яруса на стеллажах из углового железа. Первый ярус должен приподниматься от пола на высоту 50 см.
Собак размещают индивидуально в отдельных боксах (кабинах) размером примерно 1,5 м 2 .
Кошек размещают в вольерах по 5 голов. Там же предусматривают устройство полок-лежаков. Площадь на одну кошку 0,5 м 2 . Перед входом в вольер оборудуют сетчатый тамбур.
Содержание животных в питомниках должно по возможности соответствовать условиям существования их в природе. Это положение особенно относится к диким, родившимся на воле животным и птицам (дикие голуби, воробьи, домашние серые мыши и крысы). В неблагоприятных для них условиях содержания и кормления эти животные быстро погибают в неволе (особенно воробьи и серые мыши). Обязательным условием успешной работы питомника является строгое соблюдение всех ветеринарно-санитарных, зоотехнических и зоогигиенических правил. Последние предусматривают содержание животных в просторных, светлых, сухих и чистых клетках, в хорошо вентилируемых, с нормальной температурой помещениях, рациональное и полноценное кормление и проведение профилактических мероприятий в целях предупреждения различных заболеваний. Громадное значение для питомника имеет хороший состав производителей (самцов и самок).
Питомник (виварий) должен иметь несколько отделений для содержания различных видов животных (кролики, морские свинки, мыши и т. д.). В структуру вивария входят:
1. отделение для карантинирования и адаптации вновь поступивших животных;
2. экспериментально-биологическая клиника для содержания животных, находящихся в опыте;
3. изоляторы для подозрительных на инфекционные заболевания и заведомо больных животных, уничтожение которых по условиям эксперимента нежелательно;
4. экспериментальное помещение (или манипуляционная), в котором осуществляются взвешивание, термометрия, заражение, вакцинация животных, взятие у них крови и некоторые другие процедуры.
Оборудование экспериментального помещения определяется в каждом конкретном случае задачами и условиями проводимых научных исследований.
Карантинное отделение, отделение для подопытных и изолятор для инфицированных животных размещаются в помещениях, строго изолированных одно от другого и от всех остальных помещений вивария.
Кроме основных перечисленных выше структурных единиц, в составе вивария должны находиться:
а) кормокухня из двух смежных помещений для переработки и изготовления кормов с самостоятельными выходами в коридор из каждого помещения, кладовая со специально оборудованными ларями (металлическими или обитыми внутри жестью) и холодильниками для хранения запаса кормов,
б) дезинфекционно-моечное отделение из 2 комнат, объединенных переходным автоклавом или сухожаровой камерой.
Работа дезинфекционно-моечного отделения определяется состоянием материала, поступающего на обработку. Инфицированный материал, например клетки, подстилки, кормушки, вначале дезинфицируют, а затем подвергают механической чистке и мойке. Материал, не представляющий опасности для заражения, вначале подлежит механической очистке, а затем (при необходимости) стерилизации.
Моечное помещение в правильно организованном виварии имеет мусоропровод для удаления нечистот и грузоподъемник для доставки в виварий материала и оборудования.
Рядом с дезинфекционно-моечным отделением размещаются склад чистого (запасного) инвентаря с клетками, поилками, кормушками и т. п., бытовые помещения и санитарный блок (душевая и туалет) для обслуживающего персонала.
В соответствии с существующими санитарными правилами, виварий размещается в отдельно расположенном здании или на верхнем этаже лабораторного корпуса. При размещении вивария в лабораторном корпусе он должен быть полностью изолирован от всех других помещений.
